Le regulon maltose des enterobacteries : etude systematique de la structure de ses promoteurs et analyse fonctionnelle de son activateur specifique, la proteine malt

par OLIVIER DANOT

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de M. SCHWARTZ.

Soutenue en 1995

à Paris 7 .

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  • Résumé

    Les enterobacteries sont capables d'utiliser comme source de carbone et d'energie de petites chaines glycosidiques appelees maltodextrines. Cette propriete leur est conferee par le regulon maltose, un ensemble de 7 operons codant pour 25 proteines presentes dans tous les compartiments cellulaires. Suivant les conditions, la synthese de ces proteines est modulee au niveau du demarrage de la transcription par l'action de deux activateurs: le recepteur de l'amp cyclique crp et l'activateur specifique malt, dont les effecteurs sont l'atp et le maltotriose. Malt reconnait sur l'adn une sequence asymetrique presente en plusieurs exemplaires et dans des dispositions variees dans chaque promoteur du regulon. Nous avons d'abord caracterise les elements nucleotidiques responsables de la fixation de l'arn polymerase et de l'activateur malt dans les promoteurs du regulon. Ce travail a abouti a la determination de positions importantes pour la fixation de l'arn polymerase dans les regions -35 et -10 et a la demonstration du role primordial de la disposition des sites malt dans l'activite de ces promoteurs, et plus particulierement de leurs positions relatives autour de l'axe de la double helice de l'adn. Nous avons montre que la raison d'etre du complexe nucleoproteique forme par malt sur ces sites n'est pas seulement d'augmenter l'affinite de malt pour l'adn, au moins dans le cas du promoteur malpp. Une demarche complementaire a consiste a delimiter par des moyens genetiques et biochimiques le domaine de fixation a l'adn de malt, en s'inspirant d'homologies entre malt et d'autres activateurs procaryotes. Ce domaine isole fixe specifiquement l'adn in vitro, mais active egalement in vivo la transcription des promoteurs du regulon. Nous avons obtenu dans ce domaine des mutations affectant l'activation, dont la caracterisation devrait permettre de determiner si malt contacte l'arn polymerase, et quels sont les acides amines impliques dans cette interaction


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Informations

  • Détails : 192 P.
  • Annexes : 307 REF.

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  • Cote : TS1995
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