Fonction cellulaire de la proteine gp280 et mode d'action des anticorps anti-gp280 sur l'endocytose. Etude realisee sur le sac vitellin et sur une lignee de cellules bn/msv

par SOPHIE LE PANSE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de P. VERROUST.

Soutenue en 1995

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Au cours d'etudes concernant la proteine gp330, antigene responsable de la nephrite de heymann, le laboratoire a isole une autre proteine de poids moleculaire tres proche, la proteine gp280. Les anticorps contre la proteine gp280 se sont averes etre teratogenes. Afin d'evaluer l'importance fonctionnelle de gp280, nous avons d'une part etudier l'expression de gp280 et de gp330 a l'aide de differentes techniques, sur des cultures d'embryons de rat et sur des cellules issues d'un teratocarcinome de sac vitellin de rat. Nous avons alors demontre que les deux proteines etaient concentrees dans les puits recouverts de clathrine. Gp280 est egalement decelee en dehors des puits a clathrine. Nous avons ensuite analyse la biosynthese de gp280 et de gp330. Les proteines sont synthetisees independamment et rapidement assemblees sous forme d'oligomeres de haut poids moleculaire et secretees dans le surnageant des cultures cellulaires. Cependant gp330 lie une proteine de 45kd, la proteine mrap. Enfin nous avons etudie le mode d'action des anticorps anti-gp280 et anti-gp330 sur le processus d'endocytose. Les anticorps anti-gp280 et anti-gp330 diminuent l'incorporation du #1#4c sucrose et de la peroxidase dans les cellules. De plus, des etudes morphologiques realisees a l'aide de la peroxydase ont demontre une perturbation du transit des proteines internalisee. On note une rarefaction du nombre de lysosomes ainsi qu'une alterations des compartiments precoces de l'endocytose. Les anticorps anti-gp330 non teratogenes ont un effet moindre sur l'endocytose. Par contre en presence des anticorps teratogenes, on observe une dilatation et une expansion des tubes apicaux denses qui sont des structures impliquees dans le recyclage membranaire. Des experiences ont permis de suivre le devenir intracellulaire des proteines internalisees. Celles-ci sont observees dans les tubules apicaux denses suggerant un recyclage au niveau de la membrane plasmique. L'ensemble de ces observations souligne l'importance fonctionnelle de gp280 dans le developpement embryonnaire et suggere que la proteine 280 pourrait jouer le role d'un recepteur d'un ligand encore inconnu, probablement necessaire a la croissance embryonnaire


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Informations

  • Détails : 161 P.
  • Annexes : 271 REF.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Accessible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1995
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