Les pectine esterases de l'hypocotyle de vigna radiata : nature, fonctionnement et roles

par Marianne Bordenave

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de R. GOLDBERG.

Soutenue en 1995

à Paris 6 .

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  • Résumé

    Des pectine methylesterases (pme, e. C. 3. 1. 1. 11), enzymes participant au controle du degre de methylation des pectines, donc de la cohesion de l'apoplasme, ont ete extraites de parois d'hypocotyles de vigna radiata. L'eluat salin des parois isolees a ete fractionne sur colonne de carboxy-methyl sepharose ; les pics d'activite esterase obtenus contenaient au moins trois isoformes de pme, ainsi qu'une acetyle-esterase (ae). Ces differentes activites ont ensuite ete purifiees par fplc. Les trois pme purifiees, pe#, pe# et pe#, presentaient respectivement des pi de 7,5, 9,3, et 9,8, des mr de 45 000, 34 000 et 35 000 daltons, et des ph optimums de 6,0, 7,6 et 5,6. Une quatrieme activite pme, pe#, de pi acide, a ete detectee dans le fluide extracellulaire. L'ae, active sur les pectines acetylees non methylees, presentait un pi>9, une mr de 43 300, et un ph optimum de 6,5. Des sequences proteiques internes et n-terminales ont ete realisees a partir des 3 pme purifiees et de l'ae. Les sequences obtenues ont permis de cloner par pcr une partie du gene de l'ae, ainsi qu'une partie importante du gene de pe#. Le comportement enzymologique de pe#, pe#, et pe# a ete etudie en fonction du ph et de la concentration en sels. Des experiences d'elutions sequentielles des parois isolees de l'hypocotyle semblent indiquer que seule pe# est active in situ. Enfin, les activites pme et ae ont ete suivies le long de l'hypocotyle. Les parties hautes de l'hypocotyle sont enrichies en pe#, et les parties basses en pe#, pe#, pe#, et en ae. Le clonage de chacune des activites purifiees doit etre envisage pour permettre une meilleure comprehension de leurs roles respectifs au sein de la paroi


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Informations

  • Détails : 216 P.
  • Annexes : 126 REF.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Accessible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1995
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