Etude et caracterisation de canaux ioniques impliques dans le processus d'infection d'escherichia coli par des phages caudes

par MELANIE BONHIVERS

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de L. LETELLIER.

Soutenue en 1995

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Les premieres etapes du processus d'infection d'une bacterie par un bacteriophage sont la fixation irreversible de celui-ci a la surface de l'enveloppe cellulaire et l'injection de son adn dans le cytoplasme bacterien. Des etudes precedentes a notre travail ont mis en evidence la formation de canaux ioniques, dans la membrane interne de e. Coli, qui permettraient le transfert de l'adn du phage a travers l'enveloppe bacterienne. Notre travail s'est porte sur l'etude et la caracterisation de canaux ioniques impliques dans le processus d'infection d'e. Coli par les phages t7 et t5. Par une etude d'efflux de potassium et de petits solutes, nous confirmons que l'infection d'e. Coli par le phage t7 induit une augmentation de la permeabilite de la membrane interne. Par ailleurs lors de l'infection de bacteries males par le phage, cette augmentation a lieu en deux temps, elle est partiellement dependante de la synthese de proteines phagiques et cellulaires, et conduit a une infection abortive. L'analyse des efflux de potassium, du contenu intracellulaire en atp ainsi que du potentiel electrique transmembranaire lors de l'infection d'e. Coli par le phage t5, nous ont permis de mettre en evidence le role primordial du calcium au niveau de la membrane interne lors des etapes precoces de l'infection. Afin de determiner si un composant phagique participe a la formation du canal a adn, nous avons tente de purifier et de caracteriser la proteine pb2 qui constitue la fibre droite du phage t5. Cette etude nous a conduit a caracteriser des structures phagiques (fantomes de phages) et nous permet de proposer un modele pour le passage de l'adn phagique a travers la membrane externe. Enfin, nous avons etudie, par spectroscopie de fluorescence, l'interaction in vitro entre le phage t5 et son recepteur fhua, un transporteur de la membrane externe. Nous montrons que cette interaction induit l'ejection rapide et totale de l'adn phagique. De plus une etude en bicouches lipidiques planes a permis de mettre en evidence que la fixation de t5 sur fhua convertit ce transporteur specifique en un canal ionique non specifique


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Informations

  • Détails : 242 P.
  • Annexes : 312 REF.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Accessible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1995
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