Isolement, caracterisation et sequencage de fragments genomiques specifiques du sexe chez mercurialis annua l. : codent-ils pour les enzymes specifiques du sexe ?

par ZHIMIN YANG

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de B. DURAND.

Soutenue en 1995

à Orléans .

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  • Résumé

    Mercurialis annua l. (2n=16) est une euphorbiacee dioique depourvue d'heterochromosomes morphologiquement identifiables. Le sexe est determine par 3 genes nucleaires a segregations independantes, a b1 b2. La dissociation des formes dominantes telles ab ou ab conduit au sexe femelle. Trois lignees de genotype sexuel connu sont utilisees pour isoler les genes sexuels. Par amplification ap-pcr, nous avons mis en evidence des fragments specifiques du sexe. Nous avons choisi cette technique en absence de donnees sur les proteines codees par les genes sexuels et parce qu'il est impossible d'effectuer le criblage differentiel cdnas femelle/poly(a#+) males. Deux amorces sur 40, p04 (5'gtgtctcagg) et p03 (5'ctgatacgcc) fournissant repetitivement des profils electrophoretiques a fragments differentiels stables et intenses ont ete selectionnees. Un fragment femelle specifique de 750bp, 2 fragments males specifiques de 1150bp (issus des males resistant et faible) et un fragment de 900bp commun ont ete isoles et clones. Les hybridations southern montrent que les 3 premiers fragments sont specifiques du sexe. On retrouve le fragment commun dans le dna des deux sexes. La sequence du fragment femelle montre 67% d'homologies avec une sous-unite de la polygalacturonase de tomate hydrolysant la liaison -glycosidique pour liberer du galactose. C'est une confirmation de nos hypotheses car un complexe enzymatique regulateur femelle dont l'activite scinde la liaison -glycosidique du ribosylzeatine pour liberer la zeatine feminisante a ete isole au laboratoire. Le fragment femelle peut donc coder pour une telle activite. Le sequencage en cours des fragments males completera ces donnees. En fonction du genotype et des resultats obtenus, nous pouvons penser que le fragment femelle selectionne est un bon candidat pour etre une partie de b2 tandis que le fragment male peut etre b2


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  • Détails : 110 P.
  • Annexes : 72 REF.

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