Contribution à l'étude du métabolisme des cellules en culture et à l'amélioration de la production d'anticorps monoclonaux par les hybridomes

par Louiza Berchiche

Thèse de doctorat en Biochimie

Sous la direction de Francine Belleville-Nabet.

Soutenue en 1995

à Nancy 1 .


  • Résumé

    Le but de ce travail a été l'amélioration de la sécrétion d'AcM par les hybridomes en culture. Dans la première partie sont étudiées deux voies possibles de réduction de la production d'ammoniaque. L’ajout d'hydrocortisone dans le milieu de culture n'améliore pas la prolifération cellulaire et de plus tend à diminuer la production d'anticorps. Par ailleurs, le remplacement de la glutamine par l'acide glutamique a permis la croissance cellulaire et la diminution de la teneur en Nh4+ alors que la production d'AcM n'a pas été améliorée de façon significative. Dans la deuxième partie, l'hormone lactogène placentaire humaine a été testée afin de déterminer son effet sur la prolifération des hybridomes et leur sécrétion. Les résultats indiquent une diminution de la production des anticorps sans que la croissance cellulaire ne soit affectée. Cette réduction est plus importante encore lorsque le milieu est supplémente en AMPc. Ces résultats semblent cohérents avec les effets potentiels de cette hormone dans l'organisme humain. Enfin, la troisième partie présente une analyse expérimentale de l'effet de la L-Cn et d'acyl-carnitines. Les résultats obtenus mettent en évidence l'effet négatif de l'apport initial de L-Cn à des cellules non adaptées tandis qu'un apport en phase de croissance semble moins préjudiciable. On constate aussi un effet négatif de l'utilisation de fortes concentrations de L-Cn avec des cellules adaptées, par contre, on met en évidence un effet positif sur la production d'AcM par des cellules adaptées, avec une dose de l'ordre de 20 m de L-Cn. Cette même dose est sans effet sur la prolifération cellulaire. Le mécanisme d'action de la L-Cn reste encore à expliquer, cependant, nous avons montré à l'aide de L-Cn marquée que ce compose n'entrait pas dans les cellules. La L-Cn chargée positivement pourrait modifier la perméabilité cellulaire et favoriser le passage et la bêta-oxydation des acides gras

  • Titre traduit

    Contribution to study of cell metabolism in culture and to improvement of monoclonal antibody production by hybridoma cells


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Informations

  • Détails : 1 vol. (270 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 265 références

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