Le role des gibberellines dans la germination d'arabidopsis thaliana : caracterisation de nouveaux genes regules par l'hormone

par DOMINIQUE AUBERT

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de M. HERZOG.

Soutenue en 1995

à Grenoble 1 .

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  • Résumé

    Ce travail se place dans le cadre d'etudes sur les mecanismes moleculaires de regulation par les gibberellines (ga). Il a consiste en la recherche et l'etude de nouveaux genes dont l'expression est induite par les ga au cours de la germination des graines d'arabidopsis thaliana. La strategie utilisee repose sur le criblage differentiel d'une banque d'adnc. Ce crible moleculaire est base sur l'utilisation d'un inhibiteur de la biosynthese des ga qui, indirectement en bloquant la biosynthese des ga, inhibe l'expression des genes ga-regules. Les conditions d'inhibition specifique de la biosynthese des ga ont ete etablies au cours de la germination de graines d'arabidopsis thaliana de type sauvage, en utilisant l'uniconazol, un heterocycle azote de la famille des triazoles. Puis, le criblage differentiel d'une banque d'adnc de graines de 39 heures (traitees par ga et uniconazol) par une sonde complexe (graines traitees par uniconazol) a conduit a la selection de 5 adnc. L'analyse des caracteristiques structurales, des homologies de sequences et du profil d'expression au cours de la germination en particulier, en reponse aux ga, ont ete realises pour chacun d'entre-eux. Seule, l'expression d'un adnc codant pour une 3-cetoacyl-coa thiolase est induite par les ga au cours de la germination des graines d'arabidopsis thaliana. Les autres adnc correspondent a des marqueurs specifiques de la germination dont certains sont de nouvelles sequences chez a. Thaliana. Chez arabidopsis thaliana, une petite famille multigenique gasa de cinq membres, dont deux au moins sont regules par les ga, est caracterisee. Le gene gasa4 a ete isole et son expression a ete analysee au cours du developpement des graines et de la germination. Il a ete montre qu'il s'exprime tres precocemment dans la fleur puis dans la graine en germination. Par une etude en transgenie cette expression a ete localisee dans les cotyledons, et les pointes de racines primaires et laterales et egalement dans le meristeme vegetatif. De plus, la regulation de son expression est complexe et fait intervenir a la fois les gibberellines et la lumiere


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  • Annexes : 137 REF.

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