Regulation de la transcription des genes de structure de l'hydrogenase de rhodobacter capsulatus

par REGIS DE SURY D'ASPREMONT

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de P. VIGNAIS.

Soutenue en 1995

à Grenoble 1 .

mots clés

Résumé

Rhodobacter capsulatus est une bacterie pourpre photosynthetique qui est capable de se developper en photoheterotrophie et en chimioheterotrophie ainsi qu'en autotrophie, en presence d'hydrogene et de dioxyde de carbone. Ce travail a porte sur le role, dans la synthese de l'hydrogenase, de deux proteines controlant l'expression de l'operon de structure de l'hydrogenase. Le site d'interaction de l'ihf de r. Capsulatus avec le promoteur hupslc a ete identifie. Sur la base de donnees genetiques et biochimiques, un modele d'interaction entre l'ihf et l'adn a ete propose. La proteine hupr a ete purifiee apres surexpression et se fixe en amont du site de fixation de ihf sur le promoteur. Cette region contient 2 motifs palindroniques. La recherche de proteines affines pour le promoteur hupslc dans les extraits cellulaires de r. Capsulatus a permis d'identifier une nouvelle proteine (hup-bp). Cette proteine interagit avec une region de 50 nucleotides qui est indispensable pour l'activation de la transcription des genes de structure de l'hydrogenase. La transcetolase de r. Capsulatus a ete purifiee par chromatographie d'affinite sur une colonne heparine-sepharose. Le gene a ensuite ete clone et sequence

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