Etude des conditions de vitrification de solutions cryoprotectrices a base de 2,3-butanediol et suivi par r. M. N. De leur diffusion dans un rein de lapin

par JEAN-FRANCOIS PEYRIDIEU

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de J. MAZUER.

Soutenue en 1995

à Grenoble 1 .

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  • Résumé

    La conservation longue duree d'organes a basses temperatures est un des parametres qui permettront le developpement des greffes. Cette cryopreservation necessite de perfuser l'organe avec un cryoprotecteur, plus ou moins toxique, qui va gener l'organisation des molecules d'eau en cristaux de glace. En refroidissant suffisamment rapidement l'organe, il est alors possible de le vitrifier totalement. Dans ce travail les etudes ont ete realisees sur des solutions cryoprotectrices a base de 26 et 30% de 2,3-butanediol. Leurs conditions de vitrifications et de rechauffement sans cristallisation ont ete determinees par calorimetrie differentielle a balayage. Dans certaines de ces solutions, ont ete ajoutes 4% de sucre de protection cellulaire. Cette addition ameliore les conditions de non-cristallisation. Son influence sur la toxicite de la solution a ete mesuree sur des globules rouges. Elle s'est averee toujours benefique pour une conservation a 4c, et sous certaines conditions pour une cryopreservation a -196c. La solution a 30% de 2,3-butanediol a ete choisie pour une etude plus approfondie. Elle a ete perfusee dans plusieurs reins de lapins. Des morceaux de ces reins ont ete etudies en calorimetrie differentielle a balayage. La presence de l'organe facilite la vitrification et rend l'etat amorphe plus stable. Par ailleurs, la realisation d'un dispositif experimental decris dans le manuscrit, a permis de suivre par r. M. N. La diffusion du 2,3-butanediol dans un rein de lapin dont la temperature est maintenue au voisinage de 4c tout au long de la perfusion et pendant l'acquisition des images. L'homogeneite de l'impregnation a 30% de 2,3-butanediol a pu etre ainsi verifiee apres 3h de perfusion. Le protocole utilise pourra maintenant etre ajuste et la vitrification du rein de lapin envisagee


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  • Détails : 139 P.
  • Annexes : 59 REF.

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