Apoptose et evolution phenotypique des cellules corticosurrenaliennes en culture primaire

par ADRIEN NICOLAS NEGOESCU

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de J.-J. PEIGE.

Soutenue en 1995

à Grenoble 1 .

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  • Résumé

    Le cortex surrenal est une glande divisee en zones distinctes du point de vue morphologique et fonctionnel. Il est etabli que les divisions cellulaires des adrenocytes se produisent dans la couche superficielle (zones glomerulee et transitionnelle) et que ces cellules peripheriques migrent de maniere centripete. Chemin faisant, elles acquierent un phenotype different, propre aux zones fasciculee et reticulee. Enfin, l'elimination cellulaire, fortement amplifiee chez l'animal deprive en acth, se fait par apoptose dans la reticulee profonde. Le but de notre etude a ete de suivre l'evolution phenotypique adrenocytaire in vitro sur le plan de l'appartenance aux phenotypes fasciculo-reticule, glomerule et indifferencie et sur celui des syntheses proteiques. Pour les syntheses non steroidogenes, le choix s'est porte sur l'2 macroglobuline (2m), principale production proteique de ces cultures. Nous avons developpe des cultures primaires de cellules corticosurrenaliennes bovines (bac). Les cellules bac etaient d'origine fasciculo-reticulee puisque 90% des cellules nouvellement mises en culture etaient immunoreactives pour le cytochrome p450#1#7# (steroide-17-hydroxylase) et portaient des cretes mitochondriales vesiculaires. Nos resultats demontrent que la privation d'acth dirige une partie des cellules bac vers l'apoptose. L'analyse des milieux conditionnes des cellules bac cultivees en absence d'acth a revele la presence de corps apoptotiques. L'adn total des corps apoptotiques recoltes pendant les premieres 48 h de culture represente approximativement 15% de l'adn total de la couche cellulaire au debut de l'experience. Cette valeur tombe a 5% dans les cultures effectuees en presence d'acth. La majorite des corps apototiques contient le p450#1#7#. Parallelement, les cellules contenant cette enzyme disparaissent de la couche cellulaire. Pendant ce temps, les cellules bac en proliferation (pcna granulaire-positives) sont negatives pour le p-450#1#7#. Ce phenomene de remplacement semble contribuer a l'evolution in vitro des adrenocytes d'origine fasciculo-reticulee vers un phenotype indifferencie. Les cellules bac lors de leur mise en culture, comme in vivo, ne contiennent pas d'2m, dont la synthese de novo s'etablit in vitro. L'acth et l'2m exogene inhibent in vitro la synthese d'2m par les cellules bac. Ces informations nous ont portes a formuler l'hypothese d'une implication de l'2m dans le processus apoptotique


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  • Détails : 133 P.
  • Annexes : 447 REF.

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