Caracterisation du gene codant le canal potassique vegetal akt1 et etude de son expression dans des tabacs transgeniques a l'aide du gene rapporteur gus

Caracterization of the gene encoding the plant potassium channel akt1 and study of akt1 expression in transgenic tobacco using the gus reporter gene

• Auteur / Autrice : MIREILLE BASSET
• Direction : F. CASSE-DELBART
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Montpellier, ENSA

Résumé

Nous avons isole et caracterise le gene codant le canal potassique akt1 d'arabidopsis thaliana. Le gene est present en une seule copie dans le genome d'arabidopsis. La sequence codante est interrompue par 10 introns. La region sequencee en amont de l'atg (1888 pb) presente un site potentiel d'initiation de la transcription ainsi que des boites tata et caat, la region en aval du codon stop (346 pb) presente 2 signaux potentiels de polyadenylation. L'analyse des homologies de sequence entre akt1 et les sequences proteiques disponibles dans les banques de donnees suggere la presence de 3 domaines fonctionnels dans akt1: un domaine canal homologue des canaux animaux de la superfamille shaker, un site de fixation des nucleotides cycliques, et un domaine ankyrine. La presence d'un domaine ankyrine dans akt1 suggere que ce canal interagit avec une autre proteine cellulaire. Nous avons etudie l'expression d'akt1 dans des tabacs transgeniques exprimant le gene rapporteur gus sous controle de la region 5' du gene isole. Le profil d'expression est complexe. L'activite gus est souvent detectee au niveau des tissus conducteurs des tiges, au niveau des pointes des racines et des bourgeons caulinaires. Elle est detectee egalement dans le cortex racinaire, les poils absorbants, le mesophylle, les nervures et les stomates. Le profil d'expression varie d'une plante a l'autre et au cours du developpement. Au cours de la regeneration de plants de tabacs a partir de disques foliaires preleves sur les individus t1, une forte activite est detectee a la base des cals qui se developpent en bordure des disques, dans les ebauches foliacees et dans les tiges feuillees issues des cals. L'expression d'akt1 pourrait etre regulee par des facteurs environnementaux. Elle semble aussi etre associee aux processus lies au developpement et a l'organogenese