Mise au point de la transformation genetique du pelargonium par agrobacterium. Applications pour l'amelioration varietale

par MARIE-PAULE ROBICHON

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de R. JALOUZOT.

Soutenue en 1995

à Angers .

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  • Résumé

    Les principaux objectifs de l'obtenteur de pelargonium est la creation de plantes montrant de nouveaux coloris floraux et un port compact. Un programme de transformation genetique du pelargonium par agrobacterium tumefaciens a ete initie afin d'atteindre ces objectifs. La souche bacterienne eha 101 a ete utilisee avec des plasmides comportant le gene de la -glucuronidase et un gene conferant la resistance a l'hygromycine pour la mise au point des conditions de transformation. Des plantes transformees ont ete obtenues a partir de cotyledons et d'hypocotyles pour p. X hortorum et de petioles pour le p. X hederaefolium. Cette premiere partie du travail a montre que l'organisation du t-dna est un element essentiel. Afin d'eviter des integrations incompletes du t-dna ; le gene de selection doit etre situe vers la bordure gauche et le t-dna doit etre le plus court possible. Dans un second temps, les essais de transformation ont ete conduits avec des plasmides comportant des genes d'interet horticole: des genes chimeriques anti-chalcone synthetase (chs) et anti-dihydroflavonol-4-reductase (dfr) pour modifier la pigmentation florale ainsi que les genes rol susceptibles de modifier la morphogenese de la plante. A ce jour, des cals transformes avec le cadre de lecture ouvert (orf) 12 controle par les sequences regulatrices du camv ont ete obtenus. Enfin, des plantes transformees apres inoculation avec les constructions anti-chs du pelargonium et anti-dfr de l'antirrhinum majus, sous controle du promoteur et terminateur du camv ont ete obtenues. L'analyse moleculaire realisee a partir du premier clone obtenu montre l'insertion du gene anti-chs dans le p. X hederaefolium. Seule, l'observation des plantes en fleurs confirmera de l'interet de cette strategie anti-sens pour la modification de la pigmentation florale chez le pelargonium


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  • Détails : 196 P.
  • Annexes : 250 REF.

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