Mise en evidence dans l'ovocyte de xenope d'un couplage fonctionnel entre l'influx de calcium et la liberation de calcium par les stocks sensibles a l'inositol triphosphate

par PIERRE NAVARRE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de F FOURNIER.

Soutenue en 1995

à Amiens .

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  • Résumé

    Dans le but d'analyser le couplage fonctionnel existant entre une entree de calcium au travers de canaux calciques, endogenes et exogenes (neo-implantes), et le relargage de calcium a partir de stocks intracellulaires de calcium sensibles a l'inositol i,4,5-triphosphate (insp#3), nous avons utilise l'ovocyte de xenope pour ses deux qualites principales : cellule ne possedant que des stocks intracellulaires de calcium de type sensibles a l'insp#3 et vecteur de recomplementation fonctionnelle de proteines membranaires. Dans un premier temps, nous avons montre qu'une elevation d'insp#3 cytosolique evoquait une reponse biphasique correspondant a un relargage precoce de calcium a partir de ces stocks et a une entree retardee de calcium. Cette entree de calcium s'effectuant au travers de canaux calciques actives par le relargage (cracs pour calcium release activated channels) est dependante, au moins en partie, de la depletion des stocks. Une acceleration de l'entree passive de calcium induite par une variation du potentiel est capable de declencher un relargage transitoire et explosif de calcium a partir des stocks intracellulaires, visualise par le courant de chlore dependant du calcium (tin) ou par le signal fura-2. Dans un second temps, avec des ovocytes de xenope injectes avec des arn issus de cervelet de rat, nous avons pu exprime des canaux calciques dependant du voltage (vdccs) apparentes au type p. L'analyse des variations intracellulaires de calcium enregistrees par le biais du courant de chlore dependant du calcium nous indique qu'une depolarisation engendre deux composantes distinctes d'elevation du calcium cytosolique. Si la composante precose (ti) est attribuee directement a une entree de calcium au travers des vdccs, la seconde composante retardee (t2) est due a un relargage de calcium a partir des stocks. Dans ces deux etudes, nous avons montre que des modifications du calcium cytosolique par des injections directes de calcium dans l'ovocyte ou par l'augmentation de l'entree de calcium au travers des canaux endogenes (cracs) ou exogenes (vdccs apparentes au type p) peuvent moduler le relargage de calcium a partir des stocks de differentes manieres. En particulier, de discretes elevations en calcium cytosolique peuvent conduire a un relargage de calcium, ce qui confererait aux stocks sensibles a l'insp#3 un mode de relargage de calcium de type autocatalytique (cicr). Un tel mecanisme constituerait donc un processus d'initiation de la propagation de vagues de calcium en rapport avec un influx de calcium au travers de la membrane plasmique.


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Informations

  • Détails : 109 P.
  • Annexes : 89 REF.

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  • Bibliothèque : Université de Picardie Jules Verne. Bibliothèque universitaire. Section Sciences.
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