Elastases et élastine de poissons : purification, caractérisation et effets biologiques des peptides de l'élastine

par Abdelkrim Smine

Thèse de doctorat en Océanologie biologique, biotechnologies marines

Sous la direction de Yves Le Gal.

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  • Résumé

    Deux isoformes de l'elastase ont ete isolees a partir du pancreas de roussette (scyliorhinus canicula) et des cacea pyloriques de thon (thunnus albacares). Chez les deux especes, le procede de purification comporte une precipitation fractionnee par le sulfate d'ammonium, une chromatographie d'echange d'ions, une chromatographie de filtration sur gel et une chromatographie clhp. Les deux isoformes de l'elastase de roussette et de thon ont une masse moleculaire identique estimee respectivement a 26500 et 28000 da. Chez scyliorhinus canicula comme chez thunnus albacares, les elastases purifiees presentent un maximum d'activite a des ph compris entre 8,9 et 9 et a des temperatures comprises entre 45 et 55c. Ces enzymes sont fortement inhibees par les inhibiteurs specifiques des serine-proteases, alors que les chelateurs metalliques n'ont aucun effet. La composition en acides amines et les phi des elastases de thon et de roussette sont differents. L'analyse de la composition en acides amines de la sequence n-terminale des deux isoelastases de roussette montre que ces dernieres presentent 85% d'homologie avec l'alastase 2 de l'homme et de rat et seulement 65% d'homologie avec la sequence de l'elastase 1 de l'intestin de morue. L'elastine de thon (t. Albacares) a ete purifiee a partir des ligaments de la nageoire caudale et de l'aorte. L'elastine isolee a une composition en acides amines comparable a celle des elastines d'autres especes de vertebres. Les deux acides amines de liaison, la desmosine et l'isodesmosine ont ete separes et identifies. Deux fractions principales de peptides de masse moleculaire d'environ 50 et 15 kda ont ete purifiees par des chromatographies de filtration sur gel. Les peptides de l'elastine de thon et de l'elastine bovine ont ete testes en parallele sur des cultures cellulaires des fibroblastes et des keratinocytes de peau humaine. Les resultats montrent que ces peptides stimulent la synthese proteique et la proliferation cellulaire a des concentrations entre 0,3 et 1mg/ml. La voie par laquelle ces effets sont obtenus n'a pas ete definie

  • Titre traduit

    Elastase and elastin from fishs: purification, characterization and biological effects of elastin peptides


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Informations

  • Détails : 1 vol. ( 131 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr.: f. 116-131

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  • Bibliothèque : Université Aix-Marseille (Marseille. Luminy). Service commun de la documentation. Bibliothèque de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : L26283
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