Contribution a l'etude des venins de scorpions : approche par la biologie moleculaire

par BRIGITTE CEARD

Thèse de doctorat en Sciences médicales

Sous la direction de Pierre Bougis.

Soutenue en 1995

à Aix-Marseille 2 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Les neurotoxines, bien que minoritaires dans les venins de scorpions, sont responsables de la quasi totalite des effets toxiques induits chez les animaux (mammiferes, insectes et crustaces). Elles perturbent efficacement le fonctionnement de plusieurs types de canaux ioniques, parmi lesquels les canaux na#+ et k#+ des cellules excitables. La premiere partie de ce manuscrit est consacree a la purification et au clonage des adncs des principales toxines du venin de tityus serrulatus d'amerique du sud. Nous avons reussi a isoler trois fractions representant environ 100% de l'activite toxique du venin. La fraction majoritaire (34% du venin) semble etre un melange de differentes formes de toxine ts vii (la plus active des toxines ). Une seule sequence precurseur codant pour la ts vii a pu etre mise en evidence dans une banque d'adnc. Nous avons pu egalement cloner l'adnc codant pour le precurseur de la toxine la plus active du venin, la toxine ts iv, et determiner ainsi sa sequence proteique complete. La sequence c-terminale du precurseur presente le motif x-gly-lys-lys necessaire a l'-amidation de la toxine. La seconde partie de ce document decrit la criblage d'une banque adnc du scorpion androctonus australis, en utilisant une sonde correspondant a un fragment du peptide signal des precurseurs de toxines actives sur les mammiferes. Ainsi, nous avons pu isoler et sequencer un adnc codant pour le precurseur de la toxine aah iv et deux autres adncs codant pour des proteines homologues aux toxines longues actives sur les mammiferes. Quatre autres adnc codent pour des proteines plus courtes (54 residus, 7 cysteines). Elles restent tres apparentees aux toxines longues et, d'apres leur modelisation, pourraient exister sous forme de monomeres stables. Nous avons aussi mis en evidence le precurseur d'une nouvelle proteine, originellement purifiee a partir du venin de tityus serrulatus, et active sur les canaux k#+ voltage-dependant de type delayed rectifier. Elle comporte 64 residus et 3 ponts disulfures. Elle possede peu d'homologies avec les toxines de scorpions longues ou courtes et s'apparente davantage a une defensine purifiee du venin de leuirus quinquestriatus

  • Titre traduit

    Contribution to scorpion venom studies by a molecular biological approach


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Informations

  • Détails : 147 P.
  • Annexes : 370 REF.

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