Clonage moléculaire de la sialoadhésine : n nouveau membre de la superfamilles des immunoglobulines et de la ninéine : une nouvelle protéine du centrosome

par VERONIQUE BOUCKSON-CASTAING BOUCKSON

Thèse de doctorat en Biologie

Sous la direction de G. MILON.

Soutenue en 1995

à Aix Marseille 2 .

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  • Résumé

    Nous decrivons le clonage de l'adnc de deux proteines. La sialoadhesine est une molecule d'adhesion de 185 kda. Son expression est specifique aux macrophages et elle intervient dans leur liaison dependante de l'acide sialique de cellules sanguines. Elle est exprimee fortement par les macrophages des tissus lymphoides et hematopoietiques dans lesquels elle intervient tres certainement dans des interactions cellule-cellule. Nous rapportons le clonage moleculaire de la sialoadhesine murine et montrons qu'il s'agit d'un nouveau membre de la superfamille des immunoglobulines (sfig) avec 17 domaines de type ig. Des adnc issus d'epissage differentiel coderaient pour des formes solubles de la sialoadhesine de trois ou seize domaines. La forme de 16 domaines lie des cellules de facon acide sialique-dependante, suggerant que la sialoadhesine puisse agir a la fois sous la forme d'une proteine secretee et d'une proteine membranaire. Les proteines qui presentent le plus d'homologies avec la sialoadhesine sont tous des membres de la sfig (cd22, mag, la myeline des cellules de schwann et cd33) montrant l'existence d'une nouvelle famille de proteines qui lient l'acide sialique et sont impliquees dans des interactions cellulaires. La nineine est nouveau constituant des centrosomes. Sa sequence peptidique deduite predit que c'est une proteine acide (pi calcule: 4,8) ayant deux formes d'epissage alternatif de 245 et 249 kda qui comportent une region etendue organisee en coiled-coil avec des extremites globulaires. La nineine contient egalement un domaine potentiel de liaison du calcium de type ef-hand, un site potentiel de liaison du gtp et quatre leucine zippers. Des serums polyclonaux specifiques ont ete obtenus contre deux fragments recombinants de la proteine et ont ete utilises pour caracteriser la nineine par immunoblot et immunoprecipitation. Par microscopie electronique, la nineine a ete localisee a la region pericentriolaire et des etudes d'immunofluorescence ont revele que la nineine est exprimee tout au long du cycle au centrosome. A la mitose la nineine est aussi trouvee en association avec les microtubules fusoriaux. La nineine est conservee entre les especes et constitue donc un nouvel outil pour la comprehension du comportement des proteines du centrosome au cours du cycle cellulaire

  • Titre traduit

    Molecular characterization of sialoadhesin, a new member of the immunoglobulin superfamilyand of ninein, a new component of the centrosome


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Informations

  • Détails : 255 P.
  • Annexes : Bibliogr. 270 Réf.

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  • Bibliothèque : Université Aix-Marseille (Marseille. Luminy). Service commun de la documentation. Bibliothèque de sciences.
  • Disponible pour le PEB
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