Isolement et caractérisation d'une séquence répétée des Leishmania de l'ancien monde : Application au diagnostic, à l'épidémiologie et à la taxonomie

par Renaud Piarroux

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire et microbiologie

Sous la direction de H. Dumon.

Soutenue en 1995

à Aix Marseille 2 .


  • Résumé

    Nous avons cloné une banque d'ADN génomique de L. Infantum et sélectionné, par hybridation avec de l'ADN de Leishmania, un clone contenant une séquence répétée. Le test PCR dérivé de cette séquence s'est avéré spécifique des agents de la leishmaniose viscérale et assez sensible pour détecter un unique parasite. Sa fiabilité et son intérêt ont ensuite été évalués sur 556 prélèvements de moelle provenant de patients, majoritairement sidéens, suspects de leishmaniose viscérale. Ce test a été plus sensible (81%), que l'examen microscopique (62%), la myeloculture (73%) et les tests sérologiques (56%). Nous avons montre l'intérêt de la PCR pour détecter le parasite chez le vecteur. En utilisant une paire d'amorces moins spécifique, nous avons amplifie par PCR, la séquence répétée sur 35 souches représentant les differents taxa de l'ancien monde et avons clone les produits d'amplification. Nous avons construit des cladogrammes regroupant les différents taxa des leishmania de l'ancien monde. L'architecture des arbres obtenus recoupe les grandes entités clinico-épidémiologiques rencontrées dans l'ancien monde. Les souches responsables des formes cutanées forment un ensemble monophylétique distinct de celui regroupant les souches viscerotopes. Enfin nous avons propose des tests d'identification des souches bases sur l'étude du polymorphisme de restriction des produits d'amplification


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Informations

  • Détails : 140 p.
  • Annexes : 133 REF.

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