La cholesterol oxydase : modification chimique et specificite, mecanisme de l'activite isomerase

par CLAIRE LOUBAT-HUGEL

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jean-François Biellmann.

Soutenue en 1994

à Strasbourg 1 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    La cholesterol oxydase de brevibacterium sterolicum modifiee par le peroxyde d'hydrogene est inactive vis-a-vis du cholesterol solubilise en milieu tampon/surfactants. Des substrats solubles dans le tampon, et le cholesterol en microemulsion restent substrats de l'enzyme modifie. La modification semble etre due a l'oxydation de deux methionines en sulfoxydes, et implique: - perte de l'interaction de l'enzyme avec les micelles mixtes substrat/surfactant - modification de la cinetique de la reconnaissance du substrat dans le site et/ou du relargage du produit dans le milieu. Les etudes de l'activite isomerase des cholesterol oxydases de brevibacterium sterolicum et de nocardia erythropolis, en microemulsion cationique, indiquent: - un transfert de proton par l'enzyme de la position 4 du substrat a la positon 6 du produit, - la possibilite pour l'enol, intermediaire reactionnel, de se dissocier du site de l'enzyme, et d'etre enolise en solution, - des echanges de proton avec le milieu sur la base de l'enzyme qui enolise les substrats. Les vitesses relatives de ces trois processus varient pour une meme source d'enzyme, selon le substrat utilise, et pour un meme substrat, selon l'enzyme utilise. Pour l'enzyme de brevibacterium sterolicum, le transfert de proton est essentiellement intramoleculaire

  • Titre traduit

    Cholesterol oxidase: chemical modification and specificity, mechanism of the isomerase activity


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Informations

  • Détails : 279 P.
  • Annexes : 190

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.1994;1753
  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : H 503.000,1994
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