Regeneration et transformation du tournesol helianthus annuus l. Caracterisation de la descendance t1 de plantes transformees

par NATHALIE KNITTEL

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de GURTHER HAHNE.

Soutenue en 1994

à Strasbourg 1 .

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  • Résumé

    L'obtention de plantes transgeniques de tournesol helianthus annuus l. Par biotechnologie necessite l'association d'une technique de transformation des cellules vegetales et d'une technique de regeneration des cellules transformees. En un premier temps, la regeneration par organogenese directe a partir de cotyledons, la regeneration indirecte a partir de cals morphogenes et la multiplication vegetative a partir d'apex de tige ont ete testees. L'optimisation de ces techniques n'a permis d'atteindre une efficacite de regeneration elevee uniquement dans le cas de l'organogenese directe et de la multiplication vegetative. En un deuxieme temps, la transformation genetique par coculture des explants avec a. Tumefaciens precedee ou non par un bombardement avec des microparticules de tungstene a ete realisee. La transformation des cotyledons a conduit a l'obtention de cellules transformees qui n'ont jamais regenere de bourgeons transformes. Des resultats similaires ont ete obtenus lors de la transformation de cals supposes morphogenes. Par contre, la coculture avec a. Tumefaciens d'apex bombardes a permis d'obtenir des pousses t0 resistantes a la kanamycine et exprimant une activite b-glucuronidase. L'analyse de la descendance t1, issue des plantes transformees t0, par germination des semences sur kanamycine et par southern blot a confirme que les plantes t1 etaient entierement transformees. La mise au point d'un systeme de regeneration et de transformation du tournesol a partir d'apex, systeme efficace, reproductible et apparemment independant du genotype, permet d'envisager l'introduction de genes agronomiquement interessants qui valoriseront davantage le tournesol cultive


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Informations

  • Détails : 207 P.
  • Annexes : 286 REF.

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