Contrôle de l'adressage de la sporamine dans la cellule végétale

par Véronique Gomord

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées

Sous la direction de Loïc Faye.

Soutenue en 1994

à Rouen .

mots clés

• Transport intracellulaire
• Adressage moléculaire
• Protéine recombinante
• Vacuole
• Réticulum endoplasmique
• Sporamine
• Intracellular transport
• Molecular targeting
• Recombinant protein
• Vacuole
• Endoplasmic reticulum
• Protéines végétales -- Transport biologique
• Protéines recombinées
• Réticulum endoplasmique

Résumé

Le système endomembranaire ou système de sécrétion est constitué de compartiments spécifiques et distincts et de vésicules qui assurent le transport entre ces différents compartiments. Les protéines sécrétées, solubles ou membranaires, sont introduites de façon co-traductionnelle dans le réticulum endoplasmique (RE). Du RE, ces protéines sont transportées tout au long du système endomembranaire de sécrétion jusqu'à leur compartiment cible: l'appareil de Golgi, la vacuole le tonoplaste, la membrane plasmique ou le compartiment extracellulaire. Des travaux récents ont permis d'identifier des signaux spécifiques d'adressage et de rétention qui par leur interaction avec des récepteurs, permettent le transport de certaines protéines vers leur localisation finale. Nos travaux font appel aux approches de la biologie cellulaire et moléculaire pour l'étude du transport et de l'adressage des protéines dans le système endomembranaire de sécrétion chez les plantes. Nous avons modifié par mutagénèse dirigée les signaux d'adressage d'une protéine recombinante modèle, la sporamine. De plus nous avons développé un système d'expression stable de ces protéines recombinantes dans des cellules de tabac (nicotiana tabacum CV BY2). Nous avons ainsi obtenu des cellules transgéniques exprimant fortement une même protéine modèle transportée vers la vacuole (sporamine), vers le milieu extracellulaire (dpro-sporamine) ou retenue dans la fraction microsomale (SpoHDEL ou dproHDEL). L'étude de la localisation intracellulaire de SpoHDEL a permis de montrer l'accumulation de cette protéine dans un compartiment présentant une activité IDPase

Titre traduit

Sporamine, a model to study the intracellular transport of plant proteins

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