Isolement et caractérisation de l'ADNc codant pour la mévalonate kinase d'Arabidopsis thaliana par complémentation chez la levure Saccharomyces cerevisiae

par Catherine Riou-Khamlichi

Thèse de doctorat en Biomembranes

Sous la direction de YVES JOURTE.

Soutenue en 1994

à Poitiers .


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  • Résumé

    La mevalonate kinase (mv) est une enzyme cle de la voie de biosynthese des isoprenes (sterols, carotenoides, facteurs de croissance. . . ) qui catalyse la premiere etape de phosphorylation de l'acide mevalonique. Nous avons utilise un mutant thermosensible de la levure saccharomyces cerevisiae (erg12-1) deficient dans l'activite mk pour isoler, par complementation fonctionnelle, l'adnc codant pour la mk d'arabidopsis thaliana. L'adnc d'arabidopsis porte par le plasmide pcra complemente aussi bien la mutation erg12-1 que la disruption du gene erg12 de levure. Pour les deux souches transformees par pcra, le pourcentage de 5-7 dienols determine est comparable a celui d'une souche sauvage et l'activite specifique mk bien que detectable reste tres faible. L'adnc (1,64 kb) a ete sequence. Une region 5 non codante importante (322 pb) a ete observe. Cet adnc code pour une proteine de 378 acides amines qui presente 39, 38 et 34% d'identite avec les mks humaine, de rat et de levure. L'enzyme d'arabidopsis comme les trois autres mks est tres hydrophobe (40%). Nous avons identifie quatre domaines tres conserves, communs aux quatre mks. Nous avons verifie l'origine vegetale de l'adnc clone par analyses par southern et pcr menees sur l'adn genomique d'arabidopsis. L'analyse par pcr a montre que la partie codante du gene codant pour la mk de plante ne contenait pas de region intronique et l'analyse par southern a revele qu'il n'y avait probablement qu'un seul locus pour la mk dans le genome nucleaire d'arabidopsis thaliana

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  • Détails : 1 vol. (102 p.)
  • Annexes : 97 réf. bibliogr

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  • Bibliothèque : Université de Poitiers. Service commun de la documentation. Section Sciences, Techniques et Sport.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 94/POIT/2282
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