Utilisation de systemes cellulaires en vue de l'introgression de genes d'interet agronomique pour l'amelioration des bananiers

par VIET BUITRANG

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de R. HAICOUR.

Soutenue en 1994

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Le but de cette etude etait d'optimiser l'exploitation des suspensions cellulaires elaborees chez les bananiers, afin de les rendre performantes pour l'application des biotechnologies visant l'introgression de genes d'interet agronomique. L'effort a d'abord porte sur la creation de suspensions cellulaires et l'etude des principales caracteristiques cytologiques associees aux manifestations embryogenes afin de disposer du materiel indispensable a la mise en uvre de la regeneration a partir de protoplastes et de la transformation. L'utilisation de ces suspensions embryogenes comme source de protoplastes a permis une analyse cytologique des principaux evenements conduisant de l'isolement a la formation d'embryons somatiques ; le role inducteur des cellules nourrices a ete confirme. Sur cette base, la sequence complete protoplastes - embryons somatiques - plantes regenerees - plantes au champ a ete realisee pour la premiere fois chez le bananier. Une premiere analyse de la variabilite de ces plantes permet de conclure qu'elle n'est pas significativement differente de celle observee chez les temoins, issus de multiplication de meristemes. Ces etudes ont ete completees par des essais d'electrofusion de protoplastes ; pour l'instant, les heterofusions obtenues ont conduit a la formation de cals et de regenerations dont la nature hybride n'a pas pu etre demontree. La faisabilite de la transformation chez le bananier a d'abord ete demontree sur le plan methodologique: optimisation de l'outil biolistique, consequence de l'utilisation d'agents selectifs (antibiotiques ou herbicides) pour les seuils de viabilite et l'aptitude a la regeneration des cellules (non transformees). Apres amelioration du niveau de l'expression transitoire du gene codant pour la b-glucuronidase (gus) les premieres etapes de l'obtention de transformations stables ont ete franchies, avec la mise en evidence, apres quatre mois de culture des cellules soumises a la transformation, d'une activite gus positive sur des massifs pluricellulaires et sur des embryons somatiques


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Informations

  • Détails : 271 P.
  • Annexes : 221 REF.

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  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
  • Accessible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-011993
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