Caracterisation biochimiques des isoformes de l'atpase na, k dans le ventricule gauche humain sain et pathologique

par STEPHANIE DECOLLOGNE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Lionel Lelièvre.

Soutenue en 1994

à Paris 11 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Les arnm codant pour les trois isoformes de la sous-unite alpha de l'atpase na, k (alpha#1, alpha#2, alpha#3) sont exprimes dans le cur humain. Neanmoins, de nombreuses questions restent en suspens: ces trois formes sont-elles differenciables par leurs activites enzymatiques, par leurs fixations de ligands radiomarques (ouabaine) ou par une difference de leurs poids moleculaires apparents ? et quel est leur devenir dans la pathologie cardiaque ? nous avons compare les sensibilites de l'activite de l'atpase na, k a l'ouabaine, mesure les fixations d'ouabaine radiomarque, ainsi que les differences de poids moleculaires (par une technique d'immunoempreinte) des sous-unites alpha presentes dans des vesicules membranaires purifiees a partir de ventricule gauche humain sain et pathologique. Nous avons identifie dans les tissus sains et pathologiques trois proteines differentes reagissant specifiquement avec des anticorps monoclonaux anti-alpha#1, anti-alpha#2 et anti-alpha#3 presentant des poids moleculaires apparents de 99 kda (anti-alpha#1) et 107 kda (anti-alpha#2 et anti-alpha#3). Les sensibilites a l'ouabaine et les fixations d'ouabaine revelent dans le tissu sain une forme de tres haute affinite (ic#5#0: 7,5 2,5. 10#-#9 m et k#d: 3,6 1,6. 10#-#9 m). Cette forme n'est pas detectee dans le tissu pathologique. Dans les deux types tissulaires, nous revelons une forme de haute affinite: dans le tissu sain, ic#5#0 = 8,1 1,1. 10#-#8 m et k#d = 1,7 0,6. 10#-#8 m, dans le tissu pathologique, ic#5#0 = 1,25 0,15. 10#-#8 m et k#d = 1,3 0,2. 10#-#8 m. Une forme de basse affinite est egalement revelee dans le tissu pathologique, ic#5#0 = 2,5 1,1. 10#-#6 m et k#d = 1,3 0,3. 10#-#7 m. Deux (ou trois ?) isoformes fonctionnelles de l'atpase na, k de differents poids moleculaires apparents ont ete revelees dans le ventricule gauche humain sain et pathologique. Les affinites apparentes pour l'ouabaine detectees sont relativement faibles comparees aux concentrations de digitaliques circulantes (de l'ordre de 1 nm), excepte pour la forme de tres haute affinite detectee dans le tissu sain

  • Titre traduit

    Biochemical characterization of na, k-atpase isoforms in healthy and failing human left ventricles


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  • Détails : 162 P.
  • Annexes : 212 REF.

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