Biosynthese des isoprenoides chez le fruit de poivron (capsicum annuum l. ) : mecanismes et facteurs de regulation cellulaire en conditions normales et sous l'effet de differents stress

par PHILIPPE HUGUENEY

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de B. CAMARA.

Soutenue en 1994

à Paris 11 .

mots clés

Résumé

Les terpenoides ou isoprenoides representent une famille de molecules tres diversifiees, impliquees dans un grand nombre de fonctions cellulaires. Dans la cellule vegetale, il existe deux voies majeures de biosynthese des terpenoides: l'une plastidiale et l'autre cytosolique. Le fruit de poivron (capsicum annuum l. ) constitue un modele particulierement bien adapte a l'etude de ce metabolisme. En effet, lors de la maturation du fruit, les plastes sont le siege d'une accumulation massive de composes terpeniques particuliers, les carotenoides. Parallelement, la voie cytosolique peut etre activee dans certaines conditions de stress, activation qui aboutit a la synthese intense d'une phytoalexine terpenique, le capsidiol. Le premier chapitre de ce manuscrit rapporte la caracterisation et le clonage des adnc de trois enzymes impliquees dans le metabolisme des isoprenoides: la fpp synthase, la phytoene desaturase et enfin la capsanthine-capsorubine synthase. Grace aux sondes d'adnc ainsi obtenues, le second chapitre presente l'etude de la regulation de l'expression de genes codant pour des enzymes clefs de la biosynthese des isoprenoides chez le poivron. Cette regulation a ete etudiee parallelement aux niveaux plastidial et cytosolique, d'une part, au cours du developpement du fruit et, d'autre part, au cours de la reponse du fruit a deux types de stress: l'elicitation par la cellu lase de trichoderma viride et la blessure. La troisieme partie de ce travail aborde l'etude des mecanismes post-traductionnels susceptibles de participer a la regulation de la biosynthese des terpenoides, en particulier, les remaniements des membranes plastidiales. La mise au point d'un test biochimique utilisant la capsanthine-capsorubine synthase a permis le clonage de l'adnc de pnsf, une proteine impliquee dans le processus de fusion membranaire. Ceci constitue la premiere caracterisation de ce type de proteine chez les vegetaux

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