Translocation des proteines a travers la membrane cytoplasmique des bacteries a gram positif : etude chez corynebacterium glutamicum

Protein translocation across the cytoplasmic membrane of corynebacterium glutamicum, a gram- positive bacterium: in vivo and in vitro studies

• Auteur / Autrice : SILJA SCHREMPP
• Direction : Emanuel Shechter
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Certaines proteines synthetisees dans le cytoplasme bacterien sont destinees a etre exportees hors de la cellule. Chez e. Coli, de tres nombreuses etudes in vivo et in vitro visant a elucider le(s) mecanisme(s) d'exportation des proteines a travers la membrane ont permis l'identification et la caracterisation de la voie d'exportation generale faisant intervenir les proteines sec. Dans une premiere partie du travail, nous avons etudie ce mecanisme chez corynebacterium glutamicum, une bacterie appartenant au groupe des bacteries a gram positif, pour lequel le mecanisme de secretion a travers la membrane cytoplasmique est encore peu connu. Les experiences que nous avons effectuees in vivo ont permis de montrer que l'exportation d'une proteine de la paroi s'effectuait de maniere posttraductionnelle et impliquait deux etapes: une premiere etape rapide d'insertion et de maturation ; une deuxieme etape plus lente qui inclut le passage a travers la membrane. La premiere etape est dependante de la presence d'une difference de potentiel electrochimique de protons ; par contre la deuxieme etape en depend peu mais depend fortement de la fluidite membranaire. Dans une deuxieme partie du travail, nous avons essaye de mettre au point un systeme de translocation in vitro qui n'existe pas encore chez les bacteries a gram positif. Nous avons mis au point deux de ses constituants principaux: des vesicules inversees energetiquement fonctionnelles ; une proteine precurseur (ps1) synthetisee in vitro a un tres bon niveau et potentiellement transloquable in vitro. Ces deux outils etant acquis, il devrait etre possible d'envisager de faire fonctionner un systeme homologue de translocation des proteines in vitro chez les bacteries a gram positif