Etude de la regulation de l'expression des transporteurs d'hexoses dans les cellules cancereuses coliques humaines caco-2

• Auteur / Autrice : LAHCEN MAHRAOUI
• Direction : Edith Brot-Laroche
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1994
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Notre but etait d'etudier la regulation de l'expression des transporteurs d'hexoses intestinaux. Cette etude a ete abordee dans la lignee enterocytaire humaine caco-2. Nous avons demontre que ces cellules expriment les arnm des transporteurs de type diffusion facilitee glut1, glut2, glut3 et glut5 et le cotransporteur na+/d-glucose sglt1. Nous avons plus particulierement etudie l'expression de glut5 et avons mis en evidence: 1) sa localisation membranaire apicale ; 2) l'augmentation de son niveau d'expression (arnm et proteine) en fonction de la differenciation cellulaire. L'etude de la regulation de glut5 a ete abordee en traitant ces cellules par la forskoline. Cette etude a permis de montrer que l'ampc induit une stimulation de la transcription du gene de glut5 et une stabilisation de son arnm. L'effet transcriptionnel dependant de l'ampc, qui n'est qu'en partie (50%) lie aux sequences cre situees en amont du promoteur, pourrait impliquer les perturbations ampc-dependantes du metabolisme du glucose deja observees dans ces cellules. Pour verifier cette hypothese nous avons eu recours a l'etude de clones de la lignee caco-2 qui different quant a leur niveau de consommation de glucose: seuls les clones faibles consommateurs de glucose expriment les arnm de glut5. La carence en glucose dans le milieu de culture de ces cellules provoque une chute de la concentration des arnm de glut5. Les resultats de cette etude sur les clones caco-2 ont permis egalement de classer l'ensemble des transporteurs d'hexoses qu'ils expriment en deux groupes: glut1 et glut3 dont l'expression evolue parallelement a la consommation de glucose, glut2, glut5 et sglt1 dont l'expression evolue en sens inverse. La carence en glucose augmente la concentration d'arnm de glut2 et diminue celle des autres transporteurs, ce qui suggere que le metabolisme du glucose pourrait intervenir dans le controle coordonne de l'expression des transporteurs d'hexose dans la lignee caco-2