Caracterisation de l'operon comf, un locus implique dans les etapes tardives de la transformation chez bacillus subtilis

par JOSE-ARTURO LONDONO-VALLEJO

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de P. STRAGIER.

Soutenue en 1994

à Paris 7 .

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  • Résumé

    La competence genetique chez bacillus subtilis est un etat physiologique qui permet a la cellule de fixer et de capturer de l'adn exogene de haut poids moleculaire. Nous avons caracterise le locus comf implique dans le devenir de l'adn donneur pendant la transformation. L'operon comf contient trois cistrons exprimes a partir d'un promoteur unique sous controle de la competence. La proteine comf1 est similaire aux proteines dead, une famille d'adn/arn helicases atp-dependantes et la proteine comf3 est similaire a la proteine com101a necessaire a la competence chez haemophilus influenzae. Nous avons propose que la proteine comf1 jouerait un role essentiel pendant la capture de l'adn transformant (simple brin) en tant qu'helicase adn translocase atp-dependante. En accord avec cette hypothese nous avons pu montrer que comf1 est une proteine integrale de membrane, seulement necessaire a la capture de l'adn par la cellule competente. Un blocage dans la capture est observe lorsque la proteine comf1 est surexprimee, ce qui suggere qu'elle interagit avec d'autres proteines. Nous avons montre aussi que comf1 est capable, in vitro, de fixer l'atp. Enfin, l'introduction par mutagenese dirigee de mutations ponctuelles dans le site suppose d'interaction avec les nucleotides a profondement affecte la fonction de la proteine comf1 in vivo. Certaines de ces mutations ont un effet dominant negatif lorsqu'elles sont introduites dans une souche hebergeant une copie sauvage de comf1, ce qui corrobore l'hypothese que comf1 interagit avec d'autres proteines composant l'appareil de capture de l'adn, ou avec elle-meme, pour exercer son activite supposee, helicase ou translocase. En conclusion, la proteine comf1 joue un role essentiel pendant la transformation chez b. Subtilis, probablement en tant qu'helicase adn translocase atp-dependante necessaire a la capture de l'adn simple brin. La proteine comf3 interviendrait dans les evenements ulterieurs au processus de translocation d'adn a travers la membrane cytoplasmique


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Informations

  • Détails : 167 P.
  • Annexes : 255 REF.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • Accessible pour le PEB
  • Cote : TS1994
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