Etude de constituants nucleaires par microscopie de fluorescence : cas de l'embryon precoce de souris

par DOMINIQUE VAUTIER

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de P. DEBEY.

Soutenue en 1994

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    L'imagerie en microscopie de fluorescence a bas niveau de lumiere permet de suivre en dynamique la chronologie precise des changements morphologiques de la chromatine dans des cellules vivantes. Mener en parallele une etude d'immunofluorescence indirecte et ultrastructurale guidee par l'image permet de relier la description morphologique a un aspect plus fonctionnel du noyau. Cette approche a ete utilisee pour etudier l'organisation des noyaux d'ovocytes et d'embryons de souris au cours des premiers stades de leur developpement en relation avec les variations de leur activite transcriptionnelle. Nos resultats montrent qu'a ces etats d'activites differentes sont associees des caracteristiques specifiques de l'organisation du noyau que nous avons revelees par le biais de distributions de proteines nucleaires impliquees dans la proliferation cellulaire (p-120) et dans la maturation des arn pre-messagers (snrnp et sc-35). Il apparait ainsi qu'a la fin de l'ovogenese deux classes d'ovocytes se distinguent tant par la configuration de leur chromatine que par la repartition des proteines nucleaires (p-120 et sc-35) et correspondent a une capacite differente a transcrire. Apres la fecondation, l'organisation du noyau est tres differente de celle d'un noyau de cellule somatique ou d'un ovocyte de follicule antral actif en transcription. Bien que les arns soient d'origine maternelle, p-120 et sc-35 ne sont pas detectes dans les noyaux de stade 1 cellule. Ces proteines ne seront detectees, dans les noyaux, qu'a partir du stade 2 cellules, presentant une distribution similaire a celle decrite dans les cellules somatiques. D'autre part, le meme systeme d'imagerie couple a un programme d'analyse statistique nous a permis de mesurer le contenu en adn de cellules somatiques et ainsi de situer chacune d'elles dans une des differentes phases du cycle cellulaire. Ceci nous permettra d'etablir des correlations multivariables entre le contenu en adn et d'autres parametres, tels que l'abondance et la localisation des proteines precedemment evoquees


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Informations

  • Détails : 143 P.
  • Annexes : 174 REF.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Accessible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1994
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