Thèse soutenue

Oligonucleotides antisens modifies : potentialites et limites
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Auteur / Autrice : GERARD GODARD
Direction : Claude Hélène
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences médicales
Date : Soutenance en 1994
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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La stabilite des oligonucleotides antisens vis-a-vis des nucleases, et leur penetration dans les cellules sont deux limitations majeures a leur efficacite. De nombreuses modifications chimiques ont ete realisees pour rendre les oligonucleotides plus stables vis-a-vis des nucleases. Les oligonucleotides font partie de ces molecules chimiquement modifiees. De tels oligonucleotides sont incapables de former des hybrides avec l'arn qui soient substrats de la ribonuclease h, enzyme vraisemblablement implique dans l'activite antisens des oligonucleotides. L'activite d'oligonucleotides ou b couples a des molecules reactives (1,10 phenanthroline ou psoralene) dans le but de pallier a cette deficience, a ete etudiee sur des substrats adn ou arn. La plus faible reactivite de ces molecules observee sur l'arn reflete probablement, au moins en partie, la difference de structure arn/adn et la difference de stabilite des hybrides oligo/arn-oligo/adn. Des oligonucleotides resistants aux nucleases (oligonucleotides contenant des 2,4-dideoxy-b-d-erythro-hexopyranosyls, ou couples a la lithocholamide) ont montre des proprietes interessantes. Il se trouve que certain de ces oligonucleotides peuvent induire une activite de coupure de l'arn par la rnase h plus importante qu'un oligonucleotide non modifie. Un des moyens mis en uvre afin d'ameliorer la penetration des oligonucleotides dans les cellules est de les associer a des transporteurs. L'association d'oligonucleotides a des nanoparticules de polyisohexylcyanoacrylate peut etre realise par l'intermediaire d'un cation hydrophobe, tel que le ctab. Neanmoins, ce cation pose des problemes de toxicite. Nous avons pu associer directement des oligonucleotides couples au cholesterol aux nanoparticules via la molecule de cholesterol et ainsi nous affranchir de la presence du ctab. Ces oligonucleotides, associes au ctab, ont une activite biologique specifique a des concentrations de l'ordre de 200 a 400 nm