Mutagenese dirigee des regions conservees de l'adenine adn methylase d'e. Coli (dam)

par JEAN-BAPTISTE GUYOT

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de W. GUSCHLBAUER.

Soutenue en 1994

à Paris 6 .

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  • Résumé

    La methylase dam (dna-adenine-metylase) d'e. Coli reconnait les sites gatc sur l'adn et transfere le groupement methyl de la s-adenosyl-methionine sur le groupement amino des adenines de ces sites. La sequence primaire d'acides amines de la methylase dam presente de fortes homologies avec celles de la methylase dam de t4, de m. Dpnii (qui methylent egalement la sequence gatc sur l'adn) et de m. Ecorv (qui methyle la sequence gatatc). La zone iii, commune a ces enzymes, a ete proposee comme participant a la reconnaissance de l'adn. La methylase dam d'e. Coli possede d'autres part une autre zone d'homologie, la zone iv, qui contient le motif (d, n, s), ppy, present dans toutes les n6-adenine et n4-cytosine mtases. Nous avons realise une mutagenese dirigee dans ces deux zones d'homologie afin de preciser leurs roles fonctionnels. Les mutants obtenus, testes pour la fixation de la s-adenosyl-methionine et la liaison a l'adn, soulignent l'importance de la zone iv dans le processus de methylation. Par ailleurs, nous avons etudie la validite statistique des alignements proposes pour les sequences d'acides amines des methylases. Cette etude nous a permis d'invalider un mecanisme propose d'evolution des methylases par duplication genique. D'autre part, nous avons pu confirmer la parente des enzymes de la famille dam


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Informations

  • Détails : 129 P.
  • Annexes : 234 REF.

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  • Accessible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1994
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