Principe d'etude de la cinetique cooperative de canaux chlore de cellules endotheliales humaines, par diagrammes des transformations

par ALAIN QUEYROY

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de J. VERDETTI.

Soutenue en 1994

à Grenoble 1 .

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  • Résumé

    A l'aide de la technique du patch-champ, nous avons mis en evidence des canaux chlore de grande conductance (112,5 ps) sur des cellules endotheliales de veines ombilicales humaines. Pour etudier la cinetique de ces canaux qui se presentaient par groupes, nous avons utilise une methode originale d'analyse. Tout d'abord, nous avons developpe un filtre numerique appele lisseur adaptatif pondere (lap) qui ne presente pas de temps de montee et permet de reduire considerablement l'amplitude du bruit sans alterer les signaux utiles meme lorsque ceux-ci sont brefs et contigus. Ensuite, nous avons mis au point une representation graphique de la liste des evenements issue du signal. Cette representation appelee diagramme des transformations (dt) definit des empreintes cinetiques ou figurent la nature des evenements observes, leur proportion, et les temps de sejour moyens avant leur survenue. L'interpretation de telles empreintes nous a conduit a proposer un modele dimerique cooperatif et bistable pour decrire le comportement des canaux chlore observes. Cette hypothese a ete validee a l'aide de signaux simules selon des processus cooperatifs et markoviens, les signaux simules presentant le meme type d'empreintes cinetiques que les signaux reels. Une etude systematique du principe des dt nous a conduit a proposer la realisation de sequences animees d'empreintes (cinedt) a partir de signaux de tres longues durees. Ces cinedt devraient permettre de suivre l'evolution de cinetiques complexes de groupes canalaires sans necessiter de modelisation prealable. En outre, ils devraient constituer, une aide pour determiner rapidement les periodes stationnaires d'un signal ou il y a lieu d'effectuer une modelisation precise. Sur le plan technique le lap est tres performant malgre sa simplicite, par ailleurs les dt et cinedt ouvrent la porte a l'etude de la cooperativite inter-canalaire au niveau unitaire de simples groupes de canaux. La methode d'etude de la cooperativite que nous avons developpee devrait permettre de mieux comprendre un phenomene qui, du point de vue biologique, est susceptible de jouer un role fondamental dans les mecanismes de regulation de la physiologie cellulaire. Mots clefs: canaux ioniques cooperativite cellule endotheliale patch-clamp filtre numerique adaptatif diagramme des transformations


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Informations

  • Détails : 122 P.
  • Annexes : 106 REF.

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