Contribution a l'etude du systeme immunitaire de la crevette peneide penaeus japonicus (crustacea, decapoda)

par JENNY ANTONIA RODRIGUEZ LEON

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de JEAN-PIERRE MIGNOT.

Soutenue en 1994

à Clermont Ferrand 2 .

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  • Résumé

    Les travaux presentes dans ce memoire sont motives par l'importance economique des elevages de crevettes peneides, et concernent l'etude du systeme immunitaire de penaeus japonicus. Les constituants cellulaires et plasmatiques de l'hemolymphe ont ete caracterises sur la base d'analyses histologiques en microscopie optique et electronique, et electrophoretiques, pratiquees sur differents types de preparations d'hemolymphe et de populations d'hemocytes, mixtes ou separees par centrifugation isopycnique sur percoll. L'etude du systeme immunitaire a ete aborde d'un point de vue fonctionnel. La technique de chimioluminescence a permis d'etudier des mecanismes de defense oxygene-dependant lies a la phagocytose. Des activites hemolytiques et hemagglutinantes du plasma de p. Japonicus ont ete mises en evidence ainsi qu'une activite antibacterienne de l'hemolymphe de p. Vannamei vis-a-vis de differentes souches de vibrio. Des anticorps monoclonaux specifiques de l'hemolymphe de p. Japonicus ont ete prepares par hybridation lymphocytaire. Leur specificite a ete analysee par immunofluorescence et immuno-gold et leur antigene caracterise par western-blot ou apres immunoprecipitation. Deux acmc sont marqueurs de sous-populations hemocytaires. L'acmc 40e2 est specifique d'hemocytes granuleux et d'une proteine de 142 kda (forme reduite) et l'acmc 40e10, marqueur de cellules hyalines et semi-granuleuses serait specifique d'une agglutinine isolee par immunoaffinite. Un acmc, 41b12, reconnaitrait une alpha-macroglobuline impliquee dans l'activite lytique du plasma. Un facteur de coagulation isole par hplc en deae et phase inverse a ete identifie a l'aide de l'acmc 42e8 et un seul anticorps, 44e6, est specifique de l'hemocyanine. Enfin, une proteine de 100 kda a ete isolee et identifiee de type beta-1,3-glucan binding proteine, proteine de reconnaissance caracterisee chez l'ecrevisse. Enfin, la recherche de peptides antibacteriens a ete abordee a l'aide de techniques de pcr et northern-blot, par la recherche au niveau du genome de p. Japonicus, de sequence d'attacines et de tachyplesine, respectivement caracterises chez hyalophora cecropia et tachypleus tridentatus


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  • Détails : 139 P.
  • Annexes : 238 REF.

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