L'antigene cs31a d'escherichia coli septicemiques et enterotoxinogenes : carte genetique et utilisation pour la presentation d'epitopes heterologues

par FRANCOIS BOUSQUET

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de C. VAURY.

Soutenue en 1994

à Clermont Ferrand 2 .

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  • Résumé

    La mise au point de vaccins recombinants epitopiques permettrait de lutter contre des pathogenes pour lesquels il n'existe actuellement aucun vaccin classique. De tels vaccins, d'une totale innocuite, sont constitues d'une proteine porteuse dans laquelle sont inseres un ou plusieurs epitopes provenant du microorganisme pathogene. Ces epitopes sont choisis pour leur capacite a induire une reponse immunitaire protectrice contre le pathogene. Le travail presente dans ce rapport constitue une premiere approche de l'utilisation de l'antigene cs31a comme proteine presentatrice d'epitopes heterologues. Cs31a est un antigene de surface identifie sur des souches de colibacilles enterotoxinogenes ou septicemiques bovines, ainsi que sur des colibacilles isoles de diarrhees humaines ou sur des klebsiella pneumoniae provenant d'infections nosocomiales. Ses caracteristiques genetiques et immunologiques le classent dans la famille des proteines apparentees a k88, adhesine de souches colibacillaires enterotoxinogenes porcines. Cs31a est une proteine polymerique constituee d'un grand nombre de sous-unites structurales majeures, appelees clpg, et vraisemblablement de quelques sous-unites mineures. Sa biogenese est tres complexe et fait intervenir plusieurs proteines annexes. La premiere partie du travail decrite dans ce rapport concerne la caracterisation des differents genes impliques dans la production de cs31a et la repercussion de l'absence de certains de leurs produits sur sa biogenese. Dans la seconde partie sera detaillee la construction de proteines hybrides clpg epitope viral. L'introduction d'epitopes viraux de differentes origines a ete realisee avec succes dans la region variable v3 de clpg. L'immunisation de souris par voie intraperitoneale avec des bacteries recombinantes ou les proteines hybrides purifiees conduit a la production d'anticorps specifiques de l'epitope viral. L'un des antiserums obtenus est meme capable de neutraliser in vitro l'entree du virus dans des cellules cibles en culture. Ces resultats permettent donc de poursuivre avec optimisme les etudes portant sur la possibilite d'utiliser cs31a comme proteine presentatrice d'epitopes heterologues dans un but vaccinal


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  • Détails : 126 P.
  • Annexes : 289 REF.

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