La proteine p27 de groupe des retrovirus aviaires : production d'anticorps monoclonaux et etude de l'antigenicite

par FRANCK GUYONNET

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Alain Goudeau.

Soutenue en 1993

à Tours .

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  • Résumé

    La proteine p27 de groupe des retrovirus aviaires a ete purifiee a partir du virus exogene amv(mav)b, par electrophorese preparative et electroelution. Les caracterisations biochimiques et immunologiques de cette proteine ont confirme le polymorphisme structural que presente ce constituant majeur de la capside virale. Une collection de 320 anticorps monoclonaux diriges contre cette proteine a ete isolee et l'etude de la distinction entre les virus exogenes et endogenes de leucoses aviaires a l'aide de ces anticorps a ete effectuee. L'un d'entre eux reagit specifiquement avec les virus exogenes et presente une affinite suffisante pour la detection de la proteine p27 exogene. Une cartographie epitopique de la proteine p27 exogene a l'aide d'anticorps monoclonaux a ete realisee par clivage chimique de l'antigene et identification des fragments peptidiques, ainsi qu'avec un systeme bia-core base sur l'analyse des interactions biospecifiques par resonance plasmonique de surface. Nous avons determine respectivement huit et onze epitopes differents a l'aide de ces deux methodes. En particulier, deux anticorps monoclonaux sont diriges contre une region de la proteine p27 presentant une epitope specifique de la forme exogene et un epitope specifique du virus amv(mav)b. A l'aide de programmes de predictions d'epitopes, un oligopeptide de 25 acides amines situe dans la region cooh-terminale de la proteine a ete synthetise et les resultats montrent qu'il comporte plusieurs epitopes, dont l'epitope discriminant les formes exogenes et endogenes de proteine p27. Ces travaux ont apporte des donnees relatives a l'antigenicite de la proteine p27 exogene et des outils de detection des retrovirus aviaires exogenes


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  • Détails : 281 P.
  • Annexes : 436 REF.

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