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Thèse de doctorat en Biochimie. Biologie cellulaire
Sous la direction de FRANCIS LEGAILLARD.
Soutenue en 1993
à Toulouse 3 .
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Un effet mitogene des lipoproteines de haute densite (hdl3) a ete mis en evidence et correle a leur liaison sur les cellules d'adenocarcinome pulmonaire humain a549. Les stimulations de la synthese d'adn et la proliferation cellulaire sont observees pour de faibles concentrations en hdl3. Les hdl3 se lient aux cellules a549 avec une forte affinite selon deux mecanismes: l'un specifique; l'autre de plus faible affinite est phospholipide-dependant. Les sites correspondant a la liaison specifique ont ete caracterises selon la methode de scatchard (capacite de liaison et constante de dissociation); il s'agit d'une proteine membranaire de poids moleculaire de 110 kilodaltons (kda). Deux differences importantes sont obtenues dans ces cellules par rapport a des cellules normales (fibroblastes). D'une part, le nombre des sites est 60% plus faible, d'autre part, il n'est pas stimulable par l'apport de cholesterol. La stimulation de la synthese de l'adn par les hdl3 semble etre dependante de l'occupation des sites specifiques par l'apolipoproteine ai, alors que l'occupation des sites phospholipidiques inhibe la synthese d'adn. L'analyse par electrophorese des proteines cellulaires phosphorylees sous l'effet des hdl3, montre que trois proteines de poids moleculaires respectifs 20, 24 et 28 kda ont leur degre de phosphorylation augmente. Un meme profil de phosphorylation est obtenu sous l'effet du ionophore calcique a23187. Les resultats obtenus suggerent l'implication d'un mecanisme d'action des hdl3 par augmentation du taux de calcium intracellulaire et probablement par la stimulation d'une kinase calmoduline-dependante
