Clonage et caracterisation de l'activite proteinasique de la proteine de 24-kda codee par le rna1 du virus du court noue de la vigne (gflv). Determination de l'organisation genomique du gflv

par ROGERIO MARGIS

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de LOTHAIRE PINCK.

Soutenue en 1993

à Strasbourg 1 .

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  • Résumé

    Le genome du virus du court-noue de la vigne (gflv) est compose des rna1 et rna2, monocatenaires, de polarite positive, constitues de 7342 et 3774 nucleotides respectivement. Ils comportent une proteine virale appelee vpg a leur extremite 5 et possedent une sequence poly(a) 3 terminale. Le rna1 et le rna2 codent respectivement pour une polyproteine p1 de 253-kda et une polyproteine p2 de 122-kda. Le domaine correspondant a la proteinase virale de 24-kda a ete localise a l'interieur de la p1 et un clone fonctionnel a ete obtenu. La proteinase du gflv a ete caracterisee comme une proteinase a cysteine du type chymotrypsine-like. Les residus his#4#3, glu#8#7 et cys#1#7#9 ont ete identifies comme les probables composants de la triade catalytique. Les sites de clivage cys#2#5#7/ala#2#5#8 et arg#6#0#5/gly#6#0#6, a l'interieur de la p2 ont ete determinees. Trois produits finaux de clivage ont ete caracterises: la capside, une proteine centrale de 38-kda et une proteine de 28-kda placee a l'extremite amino-terminale. Differences d'activite proteolytique ont ete observees entre la proteinase et vpgpro. Une technique de detection du gflv dans les plantes et protoplastes infectees, basee sur la combinaison entre les techniques de northern blotting et d'immunodetection, a ete developpee. Des tabacs transgeniques portant la sequence de la vpg associee a la proteinase ont montre un retard a l'infection par rapport aux plantes non transgeniques

  • Titre traduit

    Cloning and characterization of the grapevine fanleaf nepovirus rna1 encoded 24-kda proteinase. Determination of gflv genomic organisation


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Informations

  • Détails : 107 P.
  • Annexes : 247 REF.

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.1993;1605
  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : H 503.000,1993
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