Etude d'une proteine a activites de recombinaison in vitro, extraite du chou broccoli (brassica oleracea var. Italica)

par Alain Tissier

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de M. DRON.

Soutenue en 1993

à Paris 11 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Nous avons purifie une proteine a activite d'echange de brins a partir du chou broccoli (brassica oleracea var. Italica). Le chou broccoli fut choisi pour sa parente avec arabidopsis thaliana devenue recemment un modele en genetique moleculaire des plantes. La proteine purifiee, nommee bstase, a une masse moleculaire monomerique de 95 kda, et sous forme native une masse superieure a 200 kda, ce qui suggere soit oligomerisation soit association avec d'autres proteines. La bstase est active a basses concentrations (1 monomere pour 1000 nucleotides environ) et a plus hautes concentrations provoque la formation de complexes d'adn de haut poids moleculaire. L'atp stimule l'activite echange de brins de bstase qui, comme reca, catalyze preferentiellement l'echange en presence d'extremites homologues 3'. L'electrophorese bi-dimensionnelle de la proteine purifiee a revele la presence d'isoformes de masse moleculaire identique mais de pi different. Ces variations pourraient etre dues soit a des modifications post-traductionnelles soit a la presence d'isoenzymes apparentees. Ces isoformes suggerent un mecanisme de regulation de l'activite in vivo. Des fragments tryptiques ont ete obtenus et p artiellement sequences a partir de la bstase purifiee. Des oligonucleotides furent ensuite derives des sequences d'acides amines et utilises pour effectuer des pcrs a partir d'adn nucleaire ou d'arnm. Un fragment pcr, contenant une region homologue a l'un des peptides, fut retenu et partiellement se quence. Il est cependant peu probable qu'il appartienne au gene codant pour la bstase. La sequence obtenue est homologue a l'orf1 du transposon en/spm du mais. Ce resultat suggere la presence d'un tel transposon chez le chou broccoli et arabidopsis


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Informations

  • Détails : 178 P.
  • Annexes : 232 REF.

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  • Accessible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-011590
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