Etablissement d'un modele utilisant des molecules de classe 1 pour l'etude in vitro et in vivo de la fonction des molecules du cmh

par BRUNO URBERO

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de MARIKA PLA.

Soutenue en 1993

à Paris 11 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Nous avons etabli un modele utilisant des molecules de classe 1 solubles permettant l'etude in vitro et in vivo de la reconnaissance des molecules du cmh. Pour cela, le gene hybride lq (h-2l#d/q10#d) codant pour la molecule lds (h-2l#d soluble) a ete realise en joignant la partie 5 du gene de classe 1 du cmh murin h-2l#d avec la partie 3 du gene q10#d. Dans les cellules transfectees, le gene lq a ete place sous le controle du promoteur tardif de l'adenovirus. La presence dans ces cellules d'arnm specifiques du gene lq est detectee. Un anticorps reconnaissant la molecule l#d precipite une forme moleculaire dans le surnageant des cellules transfectees et une dans leur lysat. La forme extracellulaire porte des chaines oligosaccharidiques complexes, sensibles a la neuraminidase, tandis que la forme intracellulaire est beaucoup moins glycosylee et serait un precurseur de la forme secretee. Des ufs de souris fecondes balb/c-h-2#d#m#2 ont ete microinjectes avec lq place sous le controle du promoteur de la metallothioneine qui est inductible et de specificite tissulaire restreinte. Deux souris transgeniques ont ete obtenues. Un arnm specifique du transgene est detecte dans une seule des deux lignees, son expression est specifiquement detectee dans le rein et est inductible par les metaux lourds. La molecule lds a ete detectee dans le serum et dans les organes (foie et reins) des souris transgeniques. L'analyse biochimique a l'aide d'anticorps specifiques des differents domaines est en faveur de la preservation de structure tridimensionnelle, de son lien avec la beta 2-microglobuline et de sa capacite a fixer les peptides. Ainsi nous avons elabore des outils moleculaires permettant d'etudier in vitro et in vivo l'interaction entre les molecules de classe 1 du cmh et le recepteur des cellules t


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Informations

  • Détails : 171 P.
  • Annexes : 212 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-011510
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