Etude electrophysiologique, analyse de la sensibilite aux peptides d'adressage et reconstitution du canal cationique de la membrane externe mitochondriale

par FLORENCE FEVRE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de MICHEL THIEFFRY.

Soutenue en 1993

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Cette these porte sur l'etude d'un canal de grande conductance situe sur la membrane externe de la mitochondrie. Ce canal, baptise psc (peptide sensitive channel), possede une selectivite cationique et est caracterise par plusieurs etats de conductance dont les probabilites dependent du potentiel. Il a ete identifie dans les membranes mitochondriales de differents mammiferes ainsi que dans les mitochondries de la levure saccharomyces cerevisiae et du champignon neurospora crassa. Le psc a ete etudie avec differentes techniques electrophysiologiques (tip-dip, bicouches planes). Les caracteristiques du canal sont les memes quelle que soit la technique d'observation utilisee. Des etudes effectuees avec des mitochondries de levures mutantes pour le vdac (voltage dependent anionic channel: canal tres abondant de la membrane externe mitochondriale) ont demontre clairement que le psc et le vdac sont portes par des complexes proteiques differents. La plupart des proteines mitochondriales sont codees par des genes nucleaires, puis importees dans l'organite. Elles peuvent traverser les deux membranes grace a la formation transitoire de grands canaux ioniques situes aux points de jonction. Afin d'etudier l'implication eventuelle du psc dans l'importation des precurseurs mitochondriaux, nous avons teste sur l'activite electrique du canal l'effet de differents peptides dont certains correspondent a des presequences d'adressage mitochondrial. Certains peptides sont susceptibles de traverser le psc. D'autres, modifient de facon irreversible la sensibilite au potentiel du canal. Afin d'identifier les composants proteiques responsables de l'activite du canal, un protocole de solubilisation suivi d'une reconstitution fonctionnelle du psc a ete mis au point. Ceci est une premiere etape qui va permettre de purifier et d'identifier le psc


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Informations

  • Détails : 144 P.
  • Annexes : 216 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-011407
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