Introduction dans du tabac industriel de genes chimeriques codant pour une metallothioneine, dans le but de reduire la teneur en cadmium des feuilles

Introduction into tobacco of chimeric genes encoding a metallothionein, in order to decrease the cadmium level in leaves

• Auteur / Autrice : Taline Elmayan
• Direction : Mark Tepfer
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Le cadmium est un element rare present dans les sols a des concentrations moyennes de 0,15 a 0,2 ppm. Les principales sources de son absorption chez l'homme sont l'alimentation et le tabac. Les doses ingerees sont faibles, mais leurs effets sur la sante humaine sont toutefois mal connus. Dans le but de diminuer la teneur en cadmium des feuilles de tabacs industriels, plusieurs genes codant pour une metallothioneine humaine (hmtii), proteine chelatrice de metaux lourds, absente chez le tabac, ont ete introduits dans cette plante. Dans le but de faire exprimer le gene hmtii dans les racines des plantes, des etudes de specificite d'expression ont ete prealablement realisees en introduisant dans des plantes de tabac le gene rapporteur uida sous le controle de la region promotrice du gene rold d'agrobacterium rhizogenes, du promoteur de l'arn 35s du camv double dans sa region enhancer et du domaine a de ce meme promoteur, specifique des racines. Il apparait qu'un fragment de 426 pb du promoteur rold permet une expression surtout racinaire, qui est plus forte que celle obtenue avec le domaine a du promoteur 35s, mais neanmoins plus faible que celle obtenue avec le promoteur fort, mais non specifique, de l'arn 35s double dans sa region enhancer. De plus, on observe qu'une proteine de fusion hmtii/gus exprimee chez des plantes de tabacs transgeniques est bifonctionnelle in vitro et in vivo. Il apparait de plus que l'expression des genes hmtii et hmtii/gus sous le controle du promoteur du gene rold et du promoteur 35s double dans sa region enhancer, permet de modifier la repartition de ce metal chez les plantes transgeniques, puisqu'a un stade precoce environ 20% du cadmium absorbe par les plantes exprimant ce gene est transloque a la partie aerienne, contre 60% pour les plantes temoins