Isolement de masse d'ilots de langerhans a partir du pancreas de porc et cryopreservation de ces ilots

par CHRISTOPHE ARBET ENGELS

Thèse de doctorat en Sciences médicales

Sous la direction de Gérard Reach.

Soutenue en 1993

à Paris 7 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Le traitement du diabete insulino-dependant par la greffe d'ilots de langerhans xenogeniques dans un systeme de pancreas bioartificiel permettrait de contourner deux obstacles a la greffe d'ilots humains : l'approvisionnement en tissu transplantable et l'immunotherapie a long terme. Nous avons mis au point une methode d'isolement et de cryopreservation d'ilots de langerhans de porc. Le travail a permis de montrer chez le rat que l'utilisation de la solution de preservatio d'organe uw (university of wisconsin) pour la digestion enzymatique du pancreas ameliorait la fonction insulinosecretoire des ilots isoles. Nous avons, dans un deuxieme temps, adapte la methode d'isolement d'ilots de langerhans humains, decrite par ricordi, a l'isolement d'ilots de langerhans de porc : 1) nous avons utilise la solution uw pour toutes les etapes de l'isolement, du prelevement a la purification, 2) nous avons optimise la methode par le prelevement en continue des ilots dissocies, ce qui permet la digestion complete du pancreas. Nous avons obtenu une augmentation du nombre d'ilots, le rendement de purification et la reponse insulinosecretoire etaient de meilleure qualite. Ces resultats ont ete confortes par des etudes histologiques demontrant la qualite des ilots. Enfin, nous avons etudie la fonction et la survie d'ilots de langerhans cryopreserves dans la solution uw contenant soit du polyethylene-glycol (peg) soit du dmso. Nous avons realise une etude comparative sur des ilots fraichement isoles ou cryopreserves. Nous avons observe une insulinosecretion similaire dans les deux cas, l'utilisation de la solution uw-peg comme cryoprotectant permet neanmoins de simplifier la methode. L'ensemble de ce travail demontre qu'il est possible d'isoler et de cryopreserver un grand nombre d'ilots de langerhans de porc et permet d'envisager la creation d'une banque de tissu transplantable.

  • Titre traduit

    Islets of langerhans isolation and cryopreservation from pig pancreas


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