Contribution a la caracterisation des elements structuraux et fonctionnels du domaine des genes alpha-globine de poulet

par CLAUDIA V. DE MOURA GALLO-AYRES DE MOURA

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de KLAUS SCHERRER.

Soutenue en 1993

à Paris 7 .

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  • Résumé

    Cette these apporte une contribution a l'etude de la structure de la chromatine dans la region en amont du domaine -globine de poulet, par la recherche des sites hypersensibles a la dnase i (hsss) et des sites d'attachement a la matrice nucleaire (mars). Nous avons mis en evidence 9 sites hypersensibles. L'observation la plus frappante concerne la localisation des hsss, erythroide-specifiques, a 14,3 kpb du groupe de genes. Cela peut indiquer que la partie non-codante en 5 du domaine est plus large et peut aller jusqu'a environ 15 kpb. La localisation des mars en amont du groupe des genes montre leur existence de 5 a 9 kpb, en plus du site decrit auparavant situe a 3 kpb. Dans un deuxieme temps, nous avons recherche des facteurs agissant en trans dans le fragment de 1,7 kpb situe a 3 kpb en amont du groupe des genes, qui possede plusieurs elements fonctionnels deja decrits. Nous avons mis en evidence par des experiences de footprinting et de retardation de fragments d'adn 10 sites de liaison pour des facteurs proteiques. Parmi ces facteurs, deux (f6 et f8) ont ete plus etudies puisque leurs sites co-localisent aux deux mars definis dans cette region. D'apres nos resultats, leurs presences sont directement en relation avec l'etat de proliferation des cellules; f6 et f8 ne sont effectivement presents que dans les extraits de cellules proliferantes. Il semble que ces proteines soient associees en quelque sorte aux phenomenes de replication et tres probablement a l'attachement a la matrice nucleaire. En effet, nous avons pu demontrer que f6 existe dans des preparations de la matrice nucleaire. Enfin, nous avons caracterise et analyse en details la region en 3 du domaine qui presente l'activite silencer-enhancer situe a 1 kpb en aval du groupe des genes. Des experiences de transfection avec des constructions portant cette region montrent qu'un segment d'adn de 540 pb situe juste en amont de l'enhancer central possede une activite silencer. Nous avons mis en evidence un facteur (sf1) qui, selon nos resultats, est plus abondant dans des extraits des cellules ou l'expression des genes globines est reprimee et semble etre responsable pour l'effet silencer


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Informations

  • Détails : 207 P.
  • Annexes : 379 REF.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • Accessible pour le PEB
  • Cote : TS1993
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