Thèse soutenue

Utilisation d'oligonucleotides antisens contre le parasite humain leishmania amazonensis : les antisens face aux cibles structures
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Auteur / Autrice : EMANUELLE PASCOLO
Direction : Philippe Ascher
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1993
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Nous avons tente de reguler artificiellement l'expression genique du protozoaire leishmania amazonensis, parasite de l'homme, a l'aide d'oligonucleotides antisens. La sequence mini-exon choisie pour cible est presente a l'extremite 5' de tous les arn messagers de la cellule ; cela nous permet donc d'affecter la synthese de toutes les proteines du parasite avec un seul type d'oligonucleotide. Des resultats positifs ont ete obtenus in vitro avec des oligonucleotides couples a des agents photo-activables. Neanmoins, comme la sequence mini-exon est structuree en epingle a cheveux, l'efficacite de pontage de nos oligonucleotides est relativement faible, meme en presence d'un second oligonucleotide dit helper. Nous avons donc imagine une nouvelle strategie qui consiste a stabiliser artificiellement les structures en epingle par un oligonucleotide antisens. Cette strategie des complexes en double-epingle, qui fait intervenir a la fois la formation de double- et de triple-helice, a ete demontree et caracterisee sur une cible modele. De plus, il semblerait qu'un complexe en double-epingle puisse aussi se former sur la sequence mini-exon, meme si celle-ci n'est pas une cible potentielle pour la formation d'une structure en triple-helice conventionnelle. Nous possedons donc ici un nouvel outil de biologie moleculaire qui pourrait permettre, d'une part, de determiner le role des structures en epingle dans les sequences d'acides nucleiques, et, d'autre part, de reguler artificiellement l'expression genique en agissant specifiquement sur ces structures