Les glucosinolates et leurs derives dans les cruciferes : analyses par chromatographie en phase liquide et perspectives d'utilisation de l'electrophorese capillaire

par ALAIN QUINSAC

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de M. DREUX.

Soutenue en 1993

à Orléans .

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  • Résumé

    Les glucosinolates (gsl) sont des composes d'interet biologique tres repandus dans la nature. Leur diversite, leurs proprietes chimiques et physiologiques dans la plante, chez l'animal et chez l'homme sont decrites a travers une revue bibliographique. L'analyse des glucosinolates et de leurs derives est en evolution rapide depuis quelques annees. Un examen critique des nombreuses methodes mises au point pour les applications les plus diverses fait apparaitre que la chromatographie en phase liquide (cpl) est la technique la plus fiable et la plus precise. Pour repondre aux besoins d'analyses quantitatives rapides et simples, deux methodes nouvelles sont proposees. La premiere concerne un produit de degradation, la 5-vinyloxazolidine-2-thione (5-vot) dont l'action goitrigene limite l'utilisation du tourteau de colza dans l'alimentation animale. Par cette methode, la 5-vot peut etre dosee dans des milieux biologiques complexes, jusqu'a des teneurs inferieures a 1 ppb. La deuxieme methode est miseau point pour le dosage en routine des derives desulfates des glucosinolates du colza. Par rapport a la methode de reference en vigueur dans la cee, les conditions chromatographiques sont considerablement simplifiees par l'emploi d'une phase stationnaire du type silice greffee cyanopropyle. L'elution par gradient est remplacee par une elution isocratique avec de l'eau pure et le temps d'analyse est ramene de 25 a 12 minutes. Afin d'elargir le domaine d'application des analyses de glucosinolates par cpl, actuellement limite a quelques cruciferes par manque de standards qualitatifs, un ensemble de plus de quarante desulfoglucosinolates a ete prepare et etudie. Les relations mises en evidence entre leurs retentions en cpl, leurs spectres dans l'uv, leurs reactivites et leurs structures nous permettent de presenter une methode d'identification simple, rapide et sensible utilisable avec un appareillage de cpl conventionnel. Dans une derniere partie, l'electrophorese capillaire basee sur la chromatographie electrocinetique micellaire est utilisee pour le dosage des glucosinolates et des derives desulfates. Les selectivites nouvelles, les grandes efficacites de separations observees et l'etude des mecanismes de migration montrent les potentialites de cette technique pour le dosage simultane des glucosinolates intacts et des derives desulfates ou issus de leur degradation


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  • Détails : 175 P.
  • Annexes : 234 REF.

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