Régénération de la mandarine commune (Citrus deliciosa Ten. ) par embryogénèse somatique en milieu liquide : Fusions somatiques et essais de transformation génétique

par Cécile Cabasson

Thèse de doctorat en Physiologie

Sous la direction de Claude Teisson.

Soutenue en 1993

à Montpellier 2 .

mots clés

• Mandarinier
• Plantes -- Variétés
• Agrumiculture
• Agrumes -- Développement
• Agrumes -- Cytogénétique
• Hybridation végétale
• Protoplastes végétaux
• Régénération (botanique)
• Transformation génétique
• Génie génétique

Résumé

Un procede de culture cellulaire en milieu liquide a ete developpe pour une espece modele, la mandarine commune (citrus deliciosa ten. ). La recherche des facteurs permettant d'orienter a volonte les cultures cellulaires de la multiplication indifferenciee vers l'embryogenese somatique, a montre que la diminution de la densite cellulaire au moment de l'inoculation est 60 fois plus efficace que le remplacement du saccharose par le galactose. La difference de comportement des cellules, placees sur galactose ou sur saccharose, se determine tres tot comme en temoignent les differences de consommation de 4 principaux macroelements (calcium, phosphore, potassium, magnesium). La modification des conditions de l'environnement hydrique, avec l'utilisation de systeme a immersion temporaire, favorise la morphogenese des embryons et leur aptitude a la germination. Disposant d'un systeme de culture cellulaire efficace, les manipulations genetiques ont pu etre envisagees. Deux techniques complementaires ont ete abordees: fusion de protoplastes et transfert de genes dans des protoplastes, tous deux induits par le polyethylene glycol. Apres fusion somatique, des jeunes plantes ont ete regenerees tandis que l'etape de regeneration a echoue dans les experimentations de transformation genetique

Titre traduit

Regeneration of willow-leaf mandarin (citrus deliciosa ten. ) by somatic embryogenesis in liquid culture. Somatic fusions and attempts of genetic transformation

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