Isolement et culture des protoplastes d'"Hevea brasiliensis" : facteurs physiologiques et biochimiques impliqués dans la récalcitrance

par Edwige Cazaux

Thèse de doctorat en Physiologie et biologie des organismes et populations

Sous la direction de Jean d' Auzac.

Soutenue en 1993

à Montpellier 2 .


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  • Résumé

    Deux types de materiel de depart ont ete utilises pour l'isolement et la culture des protoplastes. D'une part des organes tels les tiges, les petioles et les feuilles d'autre part des cals embryogenes de tegument interne de graine immature. L'optimisation des conditions de maceration conduit a l'obtention d'un nombre eleve de protoplastes viables quel que soit le materiel de depart. Parmi les methodes de culture, l'utilisation de la technique d'inclusion dans l'alginate conduit a l'obtention de quelques divisions sporadiques chez les protoplastes de tige et de petiole. Ces divisions s'arretent au stade de deux cellules. Des stress oxydatifs intervenant au cours de la maceration et de la culture de meme qu'une production d'ethylene lors de la culture pourraient etre en partie responsables de la recalcitrance des protoplastes de tige. La culture des protoplastes de cals friables embryogenes necessite leur inclusion dans l'alginate et la presence de cellules nourrices de tabac en division actives. L'effet benefique des cellules nourrices de tabac serait du a la presence de plusieurs facteurs inducteurs. La densite de culture des cellules nourrices, de meme que le temps de contact determine l'intensite de la reponse. Dans ces conditions, des microcals ont ete obtenus a partir des protoplastes de cal du clone pr107. Cependant des brunissements interviennent limitant le developpement ulterieur des microcals

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Informations

  • Détails : [7], 134 p
  • Annexes : Bibliogr.: f. 134-163

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