Regulation de la secretion de proteines dans des cultures de cellules hepatiques de rat : effets de l'insuline et de la metformine sur celle de l'albumine, et de l'insuline et la dexamethasone sur celle d'une proteine recombinante, l'hgh

par MOHAMED ZAIBI

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Prudent Padieu.

Soutenue en 1993

à Dijon .

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  • Résumé

    L'insuline stimule la secretion de l'albumine dans les cultures epitheliales de foie de rat nouveau-nes dans des milieux sans serum (sfm) ou de proteines vectrices. L'association de la metformine (n,n-dimethylbiguanide), n'entraine aucun effet de potentialisation de l'action hormonale sur cette secretion. Dans les cultures primaires d'hepatocytes de rat adulte, l'administration de la metformine ameliore le taux d'induction de la secretion d'albumine par l'insuline d'environ 30%. Sans insuline la metformine n'a aucun effet. L'administration de la metformine pendant 15 j chez le rat (50 mg/kg/j) ameliore la viabilite et le nombre d'hepatocytes par foie perfuse et augmente le taux de secretion basale de l'albumine et l'induction par l'insuline. Que ce soit in vitro ou in vivo, l'effet de la metformine est coordonne a l'insuline et l'igf-1 mais non dans le cas de la l-thyroxine. La lignee de fibroblastes fzt resulte de la transfection de cellules obtenue par perfusion du foie du rat et maintenues en une monocouche soumise a une agitation reciproque du milieu contenant des liposomes encapsulant les plasmides pej et p17hghneo. Transformee par le ras (pej), la lignee prolifere et produit de l'hgh dans le sfm. Cultivees sur microsupports, les cellules secretent 11 g d'hgh par 10#6 cellules/24 h, apres un choc thermique de 3 h a 43c du fait de l'hybridation du gene hgh au promoteur de choc thermique hsp70 (environ 3,7% en poids de proteines cellulaires). La secretion d'hgh est negativement modulee par l'insuline et positivement par la dexamethasone


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