Contribution à l'étude de la production de cyclodextrine-glycosyl-transférases par des souches alcalophiles

par Ahlam Tulfahi-Ebido

Thèse de doctorat en Génie Enzymatique, Bioconversion, Microbiologie

Sous la direction de Jean-Michel Lebeault.


  • Résumé

    L'étude de l'isolement et de la sélection de souches bactériennes (Bacillus alcalophilus) productrices d'enzymes cyclodextrine-glycosyl-transférases (CGTases) catalysant la synthèse de cyclodextrines à partir d'amidon, s'inscrit dans un contexte de microbiologie appliquée d'un grand intérêt industriel. L'étude sur la sélection de souches productrices de CGTases issues des collections internationales, a permis dans un premier temps de retrouver les capacités des souches qualifiées d'industrielles et d'étudier l'influence de la composition du milieu sur les activités enzymatiques en fioles et en fermenteur. Des mutants hyperproducteurs de CGTases ont ensuite été obtenus grâce à la mise en œuvre de la méthode de mutagénèse par rayonnement ultra-violet et la mise au point de différentes techniques de criblage. L'analyse de mille cinq cent mutants a conduit à la sélection de treize clones génétiquement stables et caractérisés par une activité alpha, beta ou gamma CGTase élevée. Par rapport à la souche de référence, quelques clones présentent une activité alpha CGTase multipliée par facteur 9, beta CGTase multipliée par facteur 2 et gamma CGTase multipliée par facteur 4. Pour le meilleur clone, la somme des trois activités est multipliée par 4. Par ailleurs, des souches sauvages ont été isolées à partir d'un biotope naturel : une terre alcaline provenant d'un champs de blé traité aux pesticides s'est révélée très intéressante pour la recherche de souches hyperproductrices de CGTases. De plus, une méthode de criblage utilisant des milieux sélectifs à base de alpha ou gamma cyclodextrine s'est avérée particulièrement efficace. Ces essais nous ont permis d'isoler six souches dont la capacité de production est supérieure à celle de la souche témoin. La souche la plus active présente une activité CGTase globale trois fois plus importante que la souche de référence. Ainsi, le choix d'un écosystème particulier associé à une procédure de sélection spécifique a permis d'atteindre une probabilité de sélection de l'ordre de 1/10, alors que les méthodes traditionnelles ne permettent pas de dépasser 1/100 à 1/1000 pour Bacillus alcalophilus.

  • Titre traduit

    Contribution to the study of the production of cyclodextrin-glycosyl-transferases with alkalophilic strains


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Informations

  • Détails : 1 vol. (147 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 134 réf.

Où se trouve cette thèse\u00a0?

  • Bibliothèque : Université de Technologie de Compiègne. Service Commun de la Documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1993 TUL 667
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