Contribution a l'etude du comportement physiologique des embryons somatiques de daucus carota l. Nus et enrobes dans un but de stabilisation a court terme

par ALAIN KERSULEC

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de JEAN-FRANCOIS HERVAGAULT.

Soutenue en 1993

à Compiègne .

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  • Résumé

    L'embryogenese somatique offre un haut potentiel de propagation des plantes toutes identiques entre elles. Trois facteurs principaux limitent l'utilisation des embryons somatiques: -le potentiel embryogene de la plante mere; -la protection de l'embryon somatique; -le stockage des embryons a moyen et long terme. Ces trois points ont ete etudies sur la carotte (daucus carota l. , variete nanco). Nos resultats ont montre que le potentiel embryogene d'une suspension cellulaire pouvait etre tres fortement augmente en agissant sur l'inoculum cellulaire (densite, stade physiologique), la composition du milieu de culture (hormones, saccharose, calcium) et en exercant des stress osmotiques. Dans une deuxieme partie, concernant la protection des embryons somatiques, le support de l'immobilisation: l'alginate de calcium, a ete caracterise: les conditions de gelification, la durete, la cohesion et l'a#w des billes, la diffusion de gaz et d'elements nutritifs. Ces proprietes du support ont ete mises en relation avec le comportement des embryons encapsules et il apparait que des concentrations d'alginate sigma a 1% et protanal 1,5% protegent bien l'embryon et n'alterent pas la germination des embryons encapsules. Cependant, le taux de germination diminue avec l'augmentation des concentrations d'alginates de la bille placees sur un milieu gelose, et il est principalement lie a la limitation de la diffusion de l'oxygene dans le gel forme. Ainsi, des embryons encapsules avec de l'alginate protanal a 5% se trouvent places dans un environnement ou la teneur en oxygene est inferieure a 5%. L'effet de la durete du gel sur la croissance des embryons encapsules, s'exerce sur les embryons stockes pendant plusieurs semaines et diminue la germination des embryons mis en culture sur milieu solide. Un double enrobage, avec du pei, a ete effectue pour limiter la perte d'elements nutritifs incorpores dans la capsule et pour assurer une meilleure protection physique de l'embryon. Le pei ne diminue pas le taux de germination des embryons quand ceux-ci sont places sur un milieu liquide, mais il accentue la difference de composition de la bille d'alginate placee sur un milieu solide. Dans une troisieme partie, nous avons aborde l'etude de la stabilisation des embryons somatiques pour des periodes de stockage a court terme. Les meilleurs resultats sont apparus avec des embryons maintenus en anoxie, a 25 et 4 c. L'apport de depresseurs de l'activite de l'eau dans le milieu de culture, a 4 c a permis un fort ralentissement de la croissance des embryons somatiques tout en permettant a ces embryons traites de se convertir en plantule avec un bon taux. Ces traitements permettant aux embryons traites d'accroitre leur matiere seche, procurent une plus grande tolerance du materiel biologique a la deshydratation


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  • Détails : 161 P.
  • Annexes : 312

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