La lacticine 481, une nouvelle bacteriocine de type lantibiotique produite par lactococcus lactis : caracterisation biochimique et genetique

par Jean-Christophe Piard

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Georges Novel.

Soutenue en 1993

à Caen .

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  • Résumé

    La lacticine 481 secretee par l. Lactis subsp. Lactis cnrz 481, est une bacteriocine active contre la plupart des bacteries lactiques et contre clostridium tyrobutyricum. Le mode d'action de cette substance est bactericide mais non bacteriolytique. La lacticine 481 contient 23 acides amines dont 3 residus matures lanthionine et -methyllanthionine. Sept residus n-terminaux ont pu etre sequences par degradation d'edman. Une sonde adn synthetique, deduite de cette sequence a ete utilisee pour identifier, cloner et sequencer le gene de structure de la lacticine 481 (lct). L'analyse de la sequence d'adn indique que le gene lct code pour un prepeptide de 51 acides amines, constitue d'un propeptide de 27 residus et d'un peptide leader de 24 residus, depourvu des proprietes d'une sequence signal. L'analyse de la sequence d'acides amines de la prolacticine 481 montre que 3 residus cysteine, 2 residus serine et 2 residus threonine codes par le gene, ne sont pas presents dans la lacticine 481. A partir de ces donnees et de mesures par rmn-2d et par spectrometrie de masse, il est propose deux structures possibles dans lesquelles les residus cysteines reagissent par l'intermediaire de leur groupement thiol, avec 3 residus dehydrates provenant des residus serine et threonine, pour former 2 residus lanthionine et 1 residu -methyllanthionine. Le 4eme residu threonine est present dans la lacticine 481 sous forme de dehydrobutyrine. Des etudes d'hybridation adn-adn ont montre que le gene lct est porte par un plasmide chez l. Lactis 481 et qu'il peut etre transfere par conjugaison. Le gene lct est sous controle de son propre promoteur et est transcrit en arnm de 280 pb et de 7-9 kb. L'expression homologue du gene lct clone dans un vecteur a nombre eleve de copies conduit a la surexpression de lacticine 481


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  • Détails : 166 P.
  • Annexes : 376 REF.

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